柴油机喷油器常见故障及维修要点(8)

柴油机喷油器常见故障及维修要点

该蛋白就较 螺旋更强硬，也较易结晶。因此，许多含 桶的跨膜蛋白的结构用X－线

晶体图像技术得到阐明。 桶蛋白在线粒体、叶绿体和一些细菌的外膜上很丰富。它们

中有些属于形成孔道的蛋白，在膜上形成含水的通道，选择性地允许一些亲水物质通过

脂双层。 链的数目变化很大，可以从8条到22条。例如大肠杆菌的OmpA含8条

链，是细菌对其病毒的受体；大肠杆菌的“孔道蛋白（porin）”含16条 链，在菌外

膜上形成含水通道；大肠杆菌的FepA含22条 链，作用是运输铁离子，筒内面由含铁

离子结合位点的球蛋白结构域铺满，在运输铁离子的时候该结构域发生构像改变。在各

种 桶蛋白中，孔道蛋白porin的结构了解得较清楚。16条链反向平行形成 片层，大小

足以卷成圆筒状结构。极性侧链排在筒内的含水通道表面，而非极性侧链则伸向筒外周

与脂双层的疏水内核发生作用。肽链的环结构往往向孔道腔内突起，使孔道变窄，从而

仅允许某些物质通过，因此许多孔道蛋白的通道作用是高度选择性的。例如麦芽糖孔道

蛋白maltoporin仅允许麦芽糖或麦芽寡糖通过大肠杆菌外膜。

筒大多为转运蛋白。有些较小的 桶其孔道完全被突向腔心的侧链充满，这些 桶

起受体或酶的作用，这时 桶只是一种形式，使膜蛋白牢固锚定在膜上，并使胞质环的

区段有合适的定向位置，能被一些特异的细胞内分子结合。虽然 桶可以有多种功能，

它们主要分布仍限于线粒体、叶绿体外膜。真核细胞和细菌的主要的跨膜蛋白还是由跨

膜 螺旋构成的。 螺旋可以滑动，可以造成较大的构象变化，从而产生将离子通道开

放、关闭的效果，来运输特定的物质，或传导细胞外信号入细胞。与此相反， 筒通过

氢键紧密地与周边结构相联，本身不易发生构象改变。

3．膜蛋白的糖基化 动物细胞的绝大部分跨膜蛋白是糖基化的。前已述及，膜蛋

白和糖脂一样，其糖基是在内质网和高尔基体的腔内加上去的，所以，寡糖链总是位于

膜的非胞质面。

（三）膜蛋白研究的常用方法

1．用去垢剂分离提取 一般来说，要溶解跨膜蛋白或紧密结合于膜上的蛋白，必

须使用能打破疏水键并破坏脂双层的试剂，其中最常用的就是去垢剂。用去垢剂分离提

取跨膜蛋白，是膜蛋白研究的重要手段。去垢剂是小的亲水脂分子，当它们与膜蛋白作

用时，其疏水端与膜蛋白的疏水区域相结合，极性端指向水中，形成溶于水的去垢剂-

膜蛋白复合物，从而可使膜蛋白在水中溶解、变性、沉淀。当去除去垢剂并加入磷脂

后，可使膜蛋白复性并恢复功能。极性去垢剂有离子型和非离子型两种，前者如

SDS ，后者如Triton。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术利用离子去垢剂SDS对膜蛋白的

强有力分离作用达到纯化、分析的目的，是膜研究手段的重大革新。

2．利用血影细胞鉴定跨膜蛋白及其分布 膜研究的最主要材料来源是动物的红细

胞。其原因是：①红细胞易于大量而纯净地获得，而其他组织多有各种细胞混杂；②红

细胞无核、无细胞器，可得到单纯的质膜，而其他细胞中各种内膜占总量的95%；③

不含细胞质的红细胞即血影细胞，制备方便，只需将细胞置于低渗溶液中，细胞就肿胀

破裂，血红蛋白就释出，从而去除了材料中的膜以外蛋白成分；④血影细胞可以处理成

破漏的、重新封闭的等不同状态，也可制成内面在外的小泡来研究（图6－9）。这

样，使各种化学物质可以分别只与膜的内面或外面接触，也可同时与内、外面接触。

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