有倒管的试管中。再将已接种的四支试管置于44℃恒温箱,培养24小时。
图1污泥的稀释和接种示意图
二、平板分离:经培养24小时后产酸产气及只产酸不产气的发酵管,分别划线接种于伊红美兰培养基或品红亚硫酸钠培养基上。置于37℃恒温箱培养18~24小时。挑选符合下列特征菌落的一小部分。进行涂片,革兰氏染色,镜检。
1 伊红美兰培养基上的菌落色泽;
(1)深紫黑色,具有金属光泽的菌落;
(2)紫黑色,不带或略带金属光泽的菌落;
(3)淡紫红色,中心色较深的菌落;
2 品红亚硫酸钠培养基上的菌落色泽;
(1)紫红色,具有金属光泽的菌落;
(2)深红色,不带或略带金属光泽菌落;
(3)淡红色,中心色较深的菌落。
三、复发酵试验:上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽孢杆菌,则挑取该菌落的另一部分再接种于内有倒管的乳糖发酵管中每管可接种分离自同一初发酵管的最典型的菌落1~3个。置于44℃恒温箱培养24小时。有产酸产气者即证实有粪大肠菌群存在。按阳性管数查粪大肠菌值检索表(附表1.2)即得出每升(1000克)粪大肠菌值。例如接种污泥量1克发酵管阳性(+),0.1毫升发酵管阴性(-),0.01毫升为阳性(+),0.001毫升为阴性(-)查附表1.2,当阳性,阴性管数为+-+-时,粪大肠菌值为0.1。
粪大肠菌值检索表(接种总量1.111克) 附表1.2
五污泥蛔虫卵的检验方法
一、污泥样品的采集:
先把泥堆尽量划为四等份,而后在每份的中间,用铁锹或小铲各采污泥约500克。同时,在堆泥的中间也采500克,一并放在塑料桶或搪瓷桶中。搅拌均匀,并挑去固体夹杂物,再从中取出500克置于塑料袋或其他容器中,带回实验室。
二、污泥样品的处理:
将现场带回的样品,倒于烧杯中,如遇样品稍干且有结块时,可将其倒于搪瓷盘中,再行搅拌,同时用大镊子,一面搅拌,一面将硬块夹碎,去掉肉眼能看出的夹杂物,如腐烂的布条、草梗、小石块等。然后,将样品装入广口瓶中,贴上标签,标明样品号码、医院名称、采样日期和处理前或处理后的情况等。
三、污泥样品的检验
上述样品处理后,应立即进行检验,不能立即进行检验时,可适当加入约5—10毫升3~5%福尔马林溶液或3%盐酸溶液,瓶口上放置一个适宜大小的表面皿。然后放于冰箱内,以防微生物的繁殖和抑制蛔虫卵的发育。
1 水洗
从已经处理过的500克污泥样品中,称取100克置于500毫升锥形量杯中,加水约500毫升。用玻璃棒搅拌后静置之。让其自然沉淀,经1~2小时后,倒去污泥上面的水,另换清水搅拌后,再让其自然沉淀,经半小时后,再倒去上面的水,另加清水,如此反复进行3~4次,直到污泥上面的水接近无色为止。
2 过滤
倒去沉淀上面的清水,用30孔/@金属筛子过滤于另一500毫升锥形量杯中,弃去阻留在筛上的泥渣。沉淀20~30分钟后,倒去沉淀上面的液体、另加清水,如此反复水洗2~3次,最后倒去上清液,将沉淀物倒入10毫升离心管中。经2500转/分离心3分钟后,倒去上清液。
3 离心飘浮
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