管内注入饱和食盐水,经用玻璃棒搅匀后,离心3分钟,由于蛔虫卵比饱和盐水的比重小,所以管中绝大多数的蛔虫卵均浮聚在液面。(注意:加入食盐水量不得少于沉淀物的20倍)。
4 离心沉淀
用毛细吸管反复吸取管中斜面上的浮膜于另一离心管中。加入清水,经搅匀后,再行离心,虫卵比水的比重大,因而下沉于管底。然后小心倒去上清液。
5 培养
注入2~3毫升清水于管中,加几滴5%福尔马林溶液,置于24~26℃恒温箱中,培养15~20天。在培养过程中,清水不得少于0.5~1.0毫升。
6 镜检
样品经培养15~20天后取出。用毛细吸管吸去上面的清水,余下含虫卵的沉淀物。在一张干净的载玻片的中央滴一滴清水。用毛细吸管吸一小滴沉淀物于水中。涂匀后盖以盖玻片,在低倍镜下检查,必要时,再换以高倍镜。记录500个以上死、活虫卵数。查完一张片子而卵数不及500个时,依同法作第二张涂片检查。涂片不宜太厚。否则视野模糊不清,影响观察。一般涂片厚度能以透过涂片尚能辩认报纸上的字迹为宜。而后在适宜的温度和湿度下。经过15~20天的培育。活蛔虫卵就会逐渐发育到幼虫期。而死卵则在同一条件下仍然保持单细胞期或停留于某一发育阶段。故易于区别。
镜检时为达到较为快速而明显地辨认幼虫起见,可在载玻片上的滴一滴预先配好避光保存的30%次氯酸钠溶液〔商品名为安替福明(antiformin〕以代替清水作成涂片,置于显微镜下观察,可以看见被包在卵的最外层的蛋白质壳逐渐溶解,使卵内的幼虫一目了然。因此亦称此液为脱壳液。如遇沉淀物中渣子较多卵数较少时,可以直接注入几滴此脱壳液于离心管中,与沉淀物混合并搅匀之,而后吸一滴混合液于载玻片上,盖以盖玻片,直接镜检即可。此时视野格外清晰。
在培养第15~20天未查见幼虫时,应继续培养到30天(注意:加过脱壳液的样品,不能再继续培养)。
最后,就500个以上的死、活蛔虫卵数,求出死卵的百分率。
如此检验的全过程已告结束,可从冰箱中取出剩余的样品,处理之。
六结核杆菌的检验方法
甲、污水
一、集菌:
根据检验室条件,可以选用滤膜集菌法或离心集菌法。
1 滤膜集菌法:采用经煮沸消毒的醋酸纤维膜(孔径0.3~0.7微米)和特制的金属滤器,安装严密
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