桉树在合肥地区的引种栽培与抗寒性研究 - 图文(5)

３．１引种试验区概况

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材料与方法 引种试验区设在合肥市瑶海区大兴镇钟油坊村，位于东经１１７０１７?，北纬３１０５１?， 属于北亚热带温润性季风气候，四季分明，光照充足，雨量丰沛，夏季炎热，冬季气 温较低，是发展桉树的北缘地带。试验地地带性土壤以黄棕壤和黏盘黄棕壤为主，非 地带性土壤以水稻土为主，ｐＨ值在６．７之间，境内地形起伏不大，海拔在８．１．４５．１ｍ 之间。年平均降雨量１０５７．２ｍｍ，但分配不均，一般６．７月份降雨量要占全年的４０％ 左右，无霜期２４５ｄ，相对湿度７６％，年均日照时数为２２８７．９ｈ，年平均温度１５．７℃，年平均极端最低温度．８．２℃，极端最低温度．１６．８℃，最冷月平均温度．１．３℃，日均温 度稳定通过１０℃的初日在３月２５日．４月３日之间，＝１０℃的平均有效积温为５２００℃左右【１ ２４１。 据合肥气象资料显示２００４．２００５年冬季最低温度．１１．２℃，持续时间２０ｄ，为近 １０年来罕见。２００７．２００８年冬季连续发生５次降雪，雨雪冰冻期达２８ｄ，最大积雪 深度超过４０ｃｍ，肥东甚至出现．１３．Ｏ＇Ｃ的最低温，２００８年与２００５年冬季并列为自１９８７ 年同期以来气温最低值。

３．２试验材料

桉树品种筛选实验材料由河南省林业厅种苗公司提供的营养钵幼苗，均为澳大利 亚本土较耐寒品种，并在河南省已经过２年的抗寒驯化。所引品种为：河红桉 （Ｅ．ｒｕｂｉｄａ）２００棵、蓝桉（Ｅ．ｇｌｏｂｕｌｕｓ）２５０棵、悉尼蓝桉（Ｅ ｐｓｅｕｄｏｇｌｏｂｕｌｕｓ）５０ 棵、铁桉（Ｅ ｓｉｄｅｒｏｘｙｌｏｎ）５０棵。 扦插材料为经筛选在合肥地区生长良好具有抗寒性的河红桉。 抗寒性机理研究材料为河红桉，对照材料为广东湛江麻章区树人苗场提供的三种 无性系桉树幼苗ＤＨ一３２、Ｕ．６和广林９，这三种品种在广东地区生长良好，但未在合 肥地区进行低温驯化试验，抗寒能力不强。

３．３材料处理

３．３．１桉树品种筛选

每定植小区栽植桉树５０株，共１１小区，小区采用完全随机排列。定植时间为 ２００４年４月。株、行距为ｌｍｘｌｍ。定植前后按规范技术操作进行整地、施肥、浇水。 苗木成活后基本上未加抚育，苗木越冬没有采用任何防护措施。

３．３．２抗寒性品种河红桉扦插试验

插条选择生长健壮、无病虫害、无机械损伤的当年萌发的半木质化嫩枝作试验材 料。剪取长度为６－８ｃｍ，剪去穗条基部３ｃｍ以下的叶片，插穗上部保留的叶片较大时， 应剪去一半或１／３。穗条采取后用清水浸泡、保湿带回室内。把制作好的插穗基部置 于ｌｇ／Ｌ的多菌灵溶液中消毒１０．１５ｍｉｎ。 以草炭土：珍珠岩：蛭石以２：１：１的比例配成基质，用０．５％高锰酸钾溶液喷 淋基质进行彻底消毒，再用清水冲洗后平铺于插床上。 激素处理采用的是正交试验设计，利用ＤＰＳ统计分析软件设计了一个４因素３ 水平的正交表Ｌ９（３４），各因素、水平见表１，正交试验设计见表３．１。 试验设计为随机完全区组，每个处理１０个插穗，共３个重复。扦插前用枝剪在 插条的下端芽的对面剪一斜口，切口尽量平整，激素处理时约浸泡扦插深度大约为 ３ｃｍ，扦插后压实四周基质，浇透基质，然后用塑料薄膜覆盖插床，薄膜内相对湿度

保持在９０％左右，温度不超过３２℃，超过时用水降温或揭去薄膜。在扦插苗上方搭 遮阳网，为防止叶面感染病菌插条扦插后每隔１０ｄ喷洒多菌灵溶液进行杀菌消毒。

表３—１实验因素及水平表Ｌ０（３．）

Ｔａｂｌｅ ３－１ Ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ

３．３．３抗寒性机理研究 选择树体中上部、无病虫害、长势中庸的一年生桉树枝条，所选的枝条的朝向和 部位尽量保持一致。按品系贴上标签装入聚乙烯袋中，带回进行实验分析。将采回的 枝条剪成３０ｃｍ左右的长度，然后用自来水冲洗数遍（洗掉泥土、灰尘等），再用蒸 馏水清洗三次，然后用吸水纸吸干水分，最后将枝条末端进行蜡封，用聚乙烯袋装好 放于冰箱（０－４＂Ｃ）中保存备用。每次处理取各参试品系的一份枝条至于超低温冰箱 中进行人工冷冻胁迫。实验设计的冷冻胁迫温度分别为ＣＫ（０＂Ｃ），．５＂Ｃ，．１０。Ｃ，．１５℃， ．２０＂Ｃ五个温度梯度，叶绿素荧光部分低温胁迫温度分别为５＂Ｃ、０＂Ｃ、．５＂Ｃ，．１０＂Ｃ， 一１５。Ｃ，．２０℃六个温度梯度，ＣＫ为室温２５＂Ｃ，每个处理重复３次。处理２４ｈ后将其 从低温冰箱里拿出在室温下进行适应。

３．４测定方法 １６

３．４．１桉树品种筛选 在２００５年５月和２００８年５月，２次对桉树进行高生长和地径生长量（地面处的 树径粗）及桉树的抗寒能力进行调查。 抗寒能力自定分级标准：共６级，０级为全部冻死；ｌ级为有８０％冻害，或地上 部全冻死，但基部有新生的萌发枝；２级为６０％冻害；３级为４０％冻害：４级为２０％ 冻害；５级为完全没有冻害。抗寒指数＝∑ａｉ／５Ｙ．Ｍｉ（ａｉ为每株级数，Ｍｉ为试验株数）。 调查结果按盖均镒【１２习提供的方法进行方差分析，对桉树不同品种的生长特性和 抗寒能力进行评比。

３．４．２扦插育苗

扦插生根后进行调查，统计生根插穗数及死亡数。运用ＤＰＳ统计分析软件进河红 桉扦插苗发根率进行统计分析，选出促进其生根的最优配方。

３．４．３抗寒性机理测定方法

（１）电导率的测定方法。将处理后的枝条取出后化冻２４ｈ，选取低温处理的叶片

避开主脉打孔，每组１５片（ｄ＝８ｍｍ），３次重复。加入２０ｍｌ去离子水，抽气３０ｍｉｎ， 振荡ｌｈ。用ＤＤＳ．３０７型电导率仪测定电导率Ｓｌ，封口沸水浴２０ｍｉｎ，冷却，平衡１０ｒａｉｎ 后，测终电导率Ｓ２，同时测定去离子水电导率Ｓｏ。 电解质渗出率计算公式为：

Ｌ（％）＝（Ｓｌ—Ｓｏ）／（Ｓ２－Ｓｏ）ｘ１００ 式中：Ｌ广相对电导率；Ｓ１．低温处理后初电导率；Ｓ２．煮后终电导率；Ｓｏ－去离子水 电导率。 用ＤＰＳ处理数据，用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ方程：Ｙ＝Ｋ／［Ｉ＋ａ ｅｘｐ（ｂｘ）］进行拟合，求出该方程出 现拐点时的温度，并以此作为其半致死温度。 （２）可溶性糖含量的提取及测定。采用葸酮比色法。称取Ｏ．１９试样，加入５ｍｌ 蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水浴提取６０ｍｉｎ，吸取提取液０．５ｍｌ，加蒸馏水１．５ｍｌ， 再加Ｏ．５ｍｌ蒽酮乙酸乙酯试剂和５ｍｌ浓Ｈ２Ｓ０４，充分振荡，立即加入沸水浴准确保温ｌｍｉｎ，自然冷却至室温，以空Ｉ兰ｔ（１．５ｍｌ水＋０．５ｍｌ蒽酮乙酸乙酯＋５ｍｌ浓Ｈ２Ｓ０４）作参照， ６３０ｎｍ下比色。

（３）脯氨酸含量的提取及测定。采用酸性茚三酮法。称取试样Ｏ．１９，加入５ｍｌ

１３ ％磺基水杨酸，封口于沸水浴上加热３０ｍｉｎ，冷却后取上清液２ｍｌ，向其中加入２ｍｌ

冰乙酸和２ｍｌ ２．５％酸性茚三酮，置沸水浴中封口显色３０ｍｉｎ，冷却后加入５ｍｌ甲苯萃 取红色物质。静置，取甲苯测定５２０ｎｍ波长处吸收值，对照标准曲线查脯氨酸的含

量。

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（３）叶绿素荧光的测定。将处理后的材料置于室温下适应２４ｈ后，每株选大小相 对一致、位置基本相同、长势良好的叶片，用便携式叶绿素荧光仪测定叶片的叶绿素 荧光诱导曲线。叶片经暗适应（３０ｍｉｎ）后，用测量光测定初始荧光Ｒ，随后用饱和脉

冲（ＰＦＤ＞６０００ｕｍｏｌ?ｍ之?￥－１）闪照后测暗适应下的最大荧光氏，可得到可变荧光 何≯民－Ｆｏ）和ＰＳＩＩ的最大光化学效率Ｒ。在自然光下适应一定时间（２０ｍｉｎ）后，待荧 光稳定后测定光适应下的稳态荧光只，接着叶片短暂遮光（３ｓ），再照射饱和脉冲光得 到光适应条件下的最大荧光民７，打开远红外光（５ｓ）后，测定光适应下的最小荧光 Ｆ毒４

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