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附 录 E (资料性附录)
冷却水、加湿设备水中嗜肺军团菌检验方法
E.1 原理
待测水样经过滤膜或离心浓缩后,一部分样品经酸处理与热处理,以减少杂菌生长,一部分样品不作处理。将上述处理与未处理样品分别接种BCYE琼脂平板并进行培养,生成典型菌落并经生化培养和血清学实验鉴定确认则判定为嗜肺军团菌。 E.2 主要仪器设备
E.2.1 平皿:90 mm
E.2.2 培养箱:35 ℃~37 ℃ E.2.3 紫外灯:波长360 nm±2 nm E.2.4 滤膜滤器
E.2.5 滤膜:孔径0.22 μm~0.45 μm E.2.6 蠕动泵 E.2.7 离心机 E.2.8 涡旋振荡器
E.2.9 普通光学显微镜、荧光显微镜、体式镜 E.2.10 水浴箱 E.3 采样
E.3.1 采样点:每套空调通风系统至少应抽取一个冷却塔,每个冷却塔采集一件样品;如有加湿设备,也至少抽取一个,每个加湿设备采集一件样品。
E.3.2 采样容器:可选择玻璃瓶或聚乙烯瓶,沉积物与软泥需用广口瓶,容器均需螺口或磨口,用前灭菌。
E.3.3 采样量:每个采样点依无菌操作取水样或沉积物、软泥等样品约200 ml。 E.3.4 中和:经氯或臭氧等消毒的样品,采样容器灭菌前加入硫代硫酸钠溶液以中和样品中的氧化物。 E.3.5 样品运输与贮存:样品最好两天内送达实验室,不必冷冻,但要避光和防止受热,室温下贮存不得超过15天。 E.4 样品处理
E.4.1 沉淀或离心:如有杂质可静置沉淀或1000 r/min离心1 min去除。
E.4.2 过滤:将经沉淀或离心的样品通过孔径0.22 μm~0.45 μm滤膜过滤,取下滤膜置于15 ml灭菌水中,充分洗脱,备用。
E.4.3 热处理:取1 ml洗脱样品置50 ℃水浴加热30 min。
E.4.4 酸处理:取5 ml洗脱样品,调pH至2.2,轻轻摇匀,放置5 min。 E.5 接种与培养
取E4.2洗脱样品、E4.3 热处理样品及E4.4 酸处理样品各0.1 ml,分别接种GVPC平板。将接种平板静置于CO2培养箱中,温度为35 ℃~37 ℃,CO2浓度为2.5%。无CO2培养箱可采用烛缸培养法。观察到有培养物生成时,反转平板,孵育10天,注意保湿。
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E.6 结果观察
军团菌生长缓慢,易被其它菌掩盖,需每天在体式镜上观察。军团菌的菌落颜色多样,通常呈白色、灰色、蓝色或紫色,也能显深褐色、灰绿色、深红色;菌落整齐,表面光滑,呈典型毛玻璃状,在紫外灯下,有荧光。 E.7 菌落验证
从每一个平皿上挑取两个可疑菌落,接种BCYE和L-半胱氨酸缺失的BCYE琼脂平板,35 ℃~37 ℃培养两天,凡在BCYE琼脂平板上生长而在L-半胱氨酸缺失的BCYE琼脂平板不生长的则为军团菌菌落。 E.8 嗜肺军团菌型别的确定
应进行生化培养与血清学实验确定嗜肺军团菌。生化培养:氧化酶阴性或弱阳性,硝酸盐还原阴性,尿素酶阴性,明胶液化阳性,水解马尿酸。血清学实验:用嗜肺军团菌诊断血清进行分型。
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附 录 F (资料性附录) 新风量检测方法
F.1 原理
在集中空调通风系统处于正常运行或规定的工况条件下,通过测量新风管某一断面的面积及该断面的平均风速,计算出该断面的新风量。如果一套系统有多个新风管,每个新风管均要测定风量,全部新
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风管风量之和即为该套系统的总新风量(m/h),根据系统服务区域内的人数,便可得出新风量结果(m/h?人)。 F.2 主要仪器
F.2.1 皮托管法
F.2.1.1 标准皮托管:Kp=0.99±0.01,或S型皮托管 Kp=0.84±0.01。 F.2.1.2 微压计:精确度应不低于2%,最小读数应不大于1 Pa。 F.2.1.3 水银玻璃温度计或电阻温度计:最小读数应不大于1 ?C。 F.2.2 风速计法
F.2.2.1 热电风速仪:最小读数应不大于0.1 m/s。
F.2.2.2 水银玻璃温度计或电阻温度计:最小读数应不大于1 ?C。 F.3 检测断面和测点
F.3.1 检测断面
F.3.1.1 若新风管服务相同功能的区域,则在新风总管或者支管上设置至少一个部位的检测断面。若新风支管服务不同功能区域,则在每类区域的新风主支管上设置至少一个部位的检测断面。
F.3.1.2 应选在气流平稳的直管段,避开弯头和断面急剧变化的部位。测量断面的下游方向距离(Ld)大于五倍当量直径(D),上游方向距离(Lu)大于2D。如无法实现,也应尽量达到Ld大于等于2D,Lu大于等于D/2,并相应增加断面上的测点数。对矩形风管,其当量直径D=2AB/(A+B),式中A、B为边长。 F.3.2 测点位置和数量
F.3.2.1 圆形风管:将风管分成适当数量的等面积同心环,测点选在各环面积中心线与垂直的两条直径线的交点上,同心环数及测点数的确定见表F.1。直径小于0.3 m且流速分布比较均匀的风管,可取风管中心一点作为测点。气流分布对称和比较均匀的风管,可只取一个方向的测点进行检测。
表 F.1 圆形风管的环数及测点数
风管直径(米) ≤1 >1~2 >2~3 环数(个) 1~2 2~3 3~4 测点数(两个方向共计) 4~8 8~12 12~16
F.3.2.2 矩形风管:将风管断面分成适当数量的等面积小块,各块中心即为测点。等面积小块的数量和测点数的确定见表F.2。
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表 F.2 矩形风管的分块及测点数 风管断面面积(m) ≤1 >1~4 >4~9 >9~16 2等面积小块数(个) 232 333 334 434 测点数(个) 4 9 12 16
F.4 风管截面面积测量
测定风管检测断面面积(F),分环或分块确定检测点。 F.5 皮托管法测定风速与风量
F.5.1 准备工作:检查微压计显示是否正常,微压计与皮托管连接是否漏气。
F.5.2 动压(Pd)的测量:将皮托管全压出口与微压计正压端连接,静压管出口与微压计负压端连接。将皮托管插入风管内,在各测点上使皮托管的全压测孔正对着气流方向,偏差不得超过10°,测出各点动压。重复测量一次,取平均值。
F.5.3 新风温度(t)的测量:一般情况下可在风管中心的一点测量。将水银玻璃温度计或电阻温度计插入风管中心测点处,封闭测孔,待温度稳定后读数。
F.5.4 新风量(Q)的计算:新风管某一断面的新风量按下式计算。
Q?3600?F?0.076Kp273?t?pd
F.6 风速计法测定风速与风量
F.6.1 当风管内的动压值Pd小于4 Pa时,可用热电风速仪测量风速。 F.6.2 准备工作:调节风速仪的零点与满度。
F.6.3 风管内平均风速(V)的测定:将风速仪放入风管内,测定各测点风速,以全部测点风速算术平均值作为检测结果。
F.6.4 新风量(Q)的计算:新风管某一断面的新风量按下式计算。
Q?3600?F?V
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式中:Q — 新风量(m/h)
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F — 风管截面面积(m)
V— 风管中空气的平均风速(m/s)
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附 录 G (资料性附录)
采 样 框
斜面 L Z 3 L1 把手 L3 磁铁 L3 L2 L3
图中:当采样框面积为100 cm2
时:L1 =100 mm,L2 =100 mm ,L3 =15 mm
当采样框面积为50 cm2
时:L1 =100 mm,L2 =50 mm ,L3 =15 mm
图 G.1 采样框模板俯视图
斜面 L4 把手
L3 L2 L3 100 cm2
时:L2 =100 mm,L3 =15 mm,L4 =3 mm
当采样框面积为50 cm2
时:L2 =50 mm,L3 =15 mm,L4 =3 mm
图 G.2 采样框模板正视图
采样框的尺寸有50 cm2
和100 cm2
两种,以适合不同现场的采样需求。 17
图中:当采样框面积为
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