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猪圆环病毒2型的分离鉴定及其对BALBc小鼠的致病性研究

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分类号 学 号 MZ12477 U D C 密 级

学 位 论 文

江苏部分地区猪圆环病毒2型的分离鉴定及其对BALB/c小

鼠的致病性研究

罗 琦

指导教师姓名:高 崧 教授,扬州大学,江苏扬州,225009 申请学位级别: 硕 士 学科专业名称: 兽医硕士 论文提交日期: 2015年6月 论文答辩日期: 2015年6月 学位授予单位:扬 州 大 学 学位授予日期: 2015年6月 答辩委员会主席:

论 文 评 阅 人:

2015年6月

江苏部分地区猪圆环病毒2型的分离鉴定及其对BALB/c小

鼠的致病性研究

Isolation and identification of porcine circovirus type 2 strains in Jiangsu Province and their pathogenicity in

BALB/c mice

研究生:罗琦 专 业:兽医硕士 导 师:高 崧 教授

扬 州 大 学 兽 医 学 院

2015年6月

江苏部分地区猪圆环病毒2型的分离鉴定及其对BALB/c小鼠的致病性研究

I

江苏部分地区猪圆环病毒2型的分离鉴定及其对BALB/c小

鼠的致病性研究

摘 要

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2, PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemic wasting syndrom,PMWS)、猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、猪繁殖障碍、猪先天性振颤等疾病的主要病原之一。病毒感染诱导宿主产生免疫抑制,免疫力大大降低,引起多种病原微生物的继发或并发感染,给养猪业造成难以估量的损失。

为了检测本地区的PCV2的流行情况,本研究采集了江苏部分地区病死猪样品及规模化屠宰场样品并使用PCR的方法检测猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)、伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪蓝耳病毒(PRRSV)六种常见病原。利用Dulac细胞对PCV2检测为阳性的样品进行病毒分离纯化,对分离到的PCV2毒株测序并做遗传进化分析。

PCV2的致病机理一直是研究的热点,但是PCV2的单独感染并未表现出明显的临床症状,而研究PCV2的感染动物模型常为价格昂贵、饲养困难的SPF猪。为选择理想的实验动物对PCV2致病性进行进一步研究,本研究选取了BABL/c小鼠作为实验动物,通过荧光定量PCR、间接免疫荧光等方法监测PCV2在小鼠体内的分布,并通病理切片研究PCV2对小鼠组织的损伤,为PCV2的BABL/c小鼠动物模型提供一定的参考。

第一章 猪圆环病毒2型的分离鉴定及几种常见病原的流行病学调查

通过PCR的方法对扬州大学动物医院采集的江苏部分地区的234份病死猪病料与规模化屠宰场采集的205份肺门淋巴结进行检测,结果显示:从动物医院采集的234份病死猪样品中检测到123份病料为PCV2阳性,阳性率为52.6%;27份病料为PCV1阳性,阳性率为11.5%;34份病料为PRV阳性,阳性率为14.5%;25份病料为PPV阳性,阳性率为10.7%;12份病料为PRRSV阳性,阳性率为6.0%;12份病料为CSFV阳性,阳性率为5.1%。从规模化屠宰场采集的205份肺门淋巴结中,分别检测到119份PCV2阳性,35份PCV1阳性,5份PPV阳性,2份PRV阳性,阳性率分别为58.1%,15.1%,2.4%和0.97%,未检测到CSFV和PRRSV。混合感染统计中PCV1和PCV2的混合感染最为严重,共有45份,占总数的10.2%;PCV2和PRV混合感染共有13份,占总数的2.9%;PCV2和PPV的混合感染共有12份,占总数的2.7%;PPV/PRV,PCV1/PCV2/PPV,

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