(五)问答题及计算题(解题要点)
1.答:核酸完全水解后可得到碱基、戊糖、磷酸三种组分。DNA和RNA的水解产物戊糖、嘧啶碱基不同。 2.答:(1)(2.5×10-7/650) × 0.34 = 1.3× 104nm = 13μm。 (2)650/ 0.34 =1.9×106/μm。
(3)88 × 0.34 nm = 30nm =0.3μm。
(4)104 × 3 × 0.34 =106nm ≈ 0.11μm。 (5)(96000/120) × 3 × 320 = 76800。 3.答:(1)设DNA的两条链分别为α和β,那么: A =βT,Tα=Aβ,Gα=Cβ,:Cα=Gβ,
因为,(Aα+ Gα)/(Tβ+ Cβ)= (Aα+ Gα)/(Aβ+ Gβ)= 0.7 所以,互补链中(Aβ+ Gβ)/(Tβ+ Cβ)= 1/0.7 =1.43 (2)在整个DNA分子中,因为A = T, G = C, 所以,A+G = T+C,(A+G)/(T+C)= 1 (3)假设同(1),则
Aα+ Tα= Tβ+ Aβ,Gα+ Cα= Cβ+Gβ, 所以,(Aα+ Tα)/(Gα+Cα)=(Aβ+ Tβ)/(Gβ+Cβ)= 0.7 (4)在整个DNA分子中
(Aα+ Tα+ Aβ+ Tβ)/(Gα+Cα+ Gβ+Cβ)= 2(Aα+ Tα)/2(Gα+Cα)= 0.7
4.答:将DNA的稀盐溶液加热到70~100℃几分钟后,双螺旋结构即发生破坏,氢键断裂,两条链彼此分开,形成无规则线团状,此过程为DNA的热变性,有以下特点:变性温度范围很窄,260nm处的紫外吸收增加;粘度下降;生物活性丧失;比旋度下降;酸碱滴定曲线改变。Tm值代表核酸的变性温度(熔解温度、熔点)。在数值上等于DNA变性时摩尔磷消光值(紫外吸收)达到最大变化值半数时所对应的温度。
5.答:为(G + C)% = (Tm – 69.3) × 2.44 ×% = (89.3-69.3) × 2.44 ×% =48.8%
G = C = 24.4%
(A + T)% = 1- 48.8% =51.2% A = T = 25.6% 6.答:(1)阳离子的存在可中和DNA中带负电荷的磷酸基团,减弱DNA链间的静电作用,促进DNA的复性;
(2)低于Tm的温度可以促进DNA复性;
(3)DNA链浓度增高可以加快互补链随机碰撞的速度、机会,从而促进DNA复性。
7.答:核酸分子中是通过3’,5’-磷酸二酯键连接起来的。
8.答:按Watson-Crick模型,DNA的结构特点有:两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互绕;碱基位于结构的内侧,而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧,通过磷酸二酯键相连,形成核酸的骨架;碱基平面与轴垂直,糖环平面则与轴平行。两条链皆为右手螺旋;双螺旋的直径为2nm,碱基堆积距离为0.34nm,两核酸之间的夹角是36°,每对螺旋由10对碱基组成;碱基按A=T,G≡C配对互补,彼此以氢键相连系。维持DNA结构稳定的力量主要是碱基堆积力;双螺旋
结构表面有两条螺形凹沟,一大一小。
9.答:在稳定的DNA双螺旋中,碱基堆积力和碱基配对氢键在维系分子立体结构方面起主要作用。
10.答:tRNA的二级结构为三叶草结构。其结构特征为:
(1)tRNA的二级结构由四臂、四环组成。已配对的片断称为臂,未配对的片断称为环。
(2)叶柄是氨基酸臂。其上含有CCA-OH3’,此结构是接受氨基酸的位置。 (3)氨基酸臂对面是反密码子环。在它的中部含有三个相邻碱基组成的反密码子,可与mRNA上的密码子相互识别。 (4)左环是二氢尿嘧啶环(D环),它与氨基酰-tRNA合成酶的结合有关。 (5)右环是假尿嘧啶环(TψC环),它与核糖体的结合有关。 (6)在反密码子与假尿嘧啶环之间的是可变环,它的大小决定着tRNA分子大小。 11.答:不同。RNA可以被水解成单核苷酸,而DNA分子中的脱氧核糖2’碳原子上没有羟基,所以DNA不能被碱水解。 12.答:(1)用专一性的RNA酶与DNA酶分别对两者进行水解。 (2)用碱水解。RNA能够被水解,而DNA不被水解。
(3)进行颜色反应。二苯胺试剂可以使DNA变成蓝色;苔黑酚(地衣酚)试剂能使RNA变成绿色。
(4)用酸水解后,进行单核苷酸的分析(层析法或电泳法),含有U的是RNA,含有T的是DNA。 13.答:已知:(1) 32μmol/L AMP的 A260消光度 A260 =32×10-6 × 15400 = 0.493 (2)47.5μmol/L CMP的 A260消光度 A260 =47.5×10-6 × 7500 = 0.356 (3)6.0μmol/L UMP的A260消光度 A260 =6.0×10-6 × 9900 = 0.0594
(4)48μmol/L AMP和32μmol/L UMP混合物的A260消光度
A260 =32×10-6 × 9900 + 48×10-6 × 15400 = 0.493 = 1.056 (5)0.325/11700 = 2.78 × 10-5mol/L (6)0.090/9200 = 9.78 × 10-6mol/L 14.答:(1)每个体细胞的DNA的总长度为: 6.4×109×0.34nm = 2.176×109 nm= 2.176m (2)人体内所有体细胞的DNA的总长度为: 2.176m×1014 = 2.176×1011km
(3)这个长度与太阳-地球之间距离(2.2×109公里)相比为: 2.176×1011/2.2×109 = 99倍
15.答:种核苷酸带电荷情况:pH2.5 pH3.5 pH6 pH8 pH11.4 UMP 负电荷最多
-1 -1.5 -2 -3 GMP 负电荷较多 -0.95 -1.5 -2 -3 AMP 负电荷较少 -0.46 -1.5 -2 -2 CMP 带正电荷 -0.16 -1.5 -2 -2
(1)电泳分离四种核苷酸时应取pH3.5 的缓冲液,在该pH值时,这四种单核苷酸之间所带负电荷差异较大,它们都向正极移动,但移动的速度不同,依次为:UMP>GMP>AMP>CMP
(2)应取pH8.0,这样可使核苷酸带较多负电荷,利于吸附于阴离子交换树脂柱。虽然pH11.4时核苷酸带有更多的负电荷,但pH过稿对树脂不利。
(3)洗脱液应调到pH2.5。当不考虑树脂的非极性吸附时洗脱顺序为CMP>AMP>UMP>GMP(根据pH2.5时核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度),但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱顺序为:CMP>AMP>UMP>GMP。
四川大学生物化学核酸部分考试题
(一)名词解释
1.米氏常数(Km值)
2.底物专一性(substrate specificity) 3.辅基(prosthetic group) 4.单体酶(monomeric enzyme) 5.寡聚酶(oligomeric enzyme) 6.多酶体系(multienzyme system) 7.激活剂(activator)
8.抑制剂(inhibitor inhibiton) 9.变构酶(allosteric enzyme) 10.同工酶(isozyme)
11.诱导酶(induced enzyme) 12.酶原(zymogen)
13.酶的比活力(enzymatic compare energy) 14.活性中心(active center) (二)英文缩写符号
1.NAD+(nicotinamide adenine dinucleotide) 2.FAD(flavin adenine dinucleotide) 3.THFA(tetrahydrofolic acid)
4.NADP+(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate) 5.FMN(flavin mononucleotide) 6.CoA(coenzyme A)
7.ACP(acyl carrier protein)
8.BCCP(biotin carboxyl carrier protein) 9.PLP(pyridoxal phosphate) (三)填空题
1.酶是 产生的,具有催化活性的 。 2.酶具有 、 、 和 等催化特点。 3.影响酶促反应速度的因素有 、 、 、 、 和 。 4.胰凝乳蛋白酶的活性中心主要含有 、 、 和 基,三者构成一个氢键体系,使其中的 上的 成为强烈的亲核基团,此系统称为 系统或 。
5.与酶催化的高效率有关的因素有 、 、 、
、 等。
6.丙二酸和戊二酸都是琥珀酸脱氢酶的 抑制剂。 7.变构酶的特点是:(1) ,(2) ,它不符合一般的 ,当以V对[S]作图时,它表现出 型曲线,而非 曲线。它是 酶。
8.转氨酶的辅因子为 即维生素 。其有三种形式,分别为 、 、 ,其中 在氨基酸代谢中非常重要,是 、 和 的辅酶。
9.叶酸以其 起辅酶的作用,它有 和 两种还原形式,后者的功能作为 载体。 10.一条多肽链Asn-His-Lys-Asp-Phe-Glu-Ile-Arg-Glu-Tyr-Gly-Arg经胰蛋白酶水解可得到 个多肽。
11.全酶由 和 组成,在催化反应时,二者所起的作用不同,其中 决定酶的专一性和高效率, 起传递电子、原子或化学基团的作用。
12.辅助因子包括 、 和 等。其中 与酶蛋白结合紧密,需要 除去, 与酶蛋白结合疏松,可以用 除去。
13.T.R.Cech和S.Alman因各自发现了 而共同获得1989年的诺贝尔奖(化学奖)。
14.根据国际系统分类法,所有的酶按所催化的化学反应的性质可分为六类 、 、 、 、 、 和 。
15.根据国际酶学委员会的规定,每一种酶都有一个唯一的编号。醇脱氢酶的编号是EC1.1.1.1,EC代表 ,4个数字分别代表 、 、 和 。
16.根据酶的专一性程度不同,酶的专一性可以分为 、 、 和 。
17.酶的活性中心包括 和 两个功能部位,其中 直接与底物结合,决定酶的专一性, 是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。 18.酶活力是指 ,一般用 表示。
19.通常讨论酶促反应的反应速度时,指的是反应的 速度,即 时测得的反应速度。
20.解释别构酶作用机理的假说有 模型和 模型两种。 21.固定化酶的优点包括 , , 等。
22.pH值影响酶活力的原因可能有以下几方面:影响 ,影响 ,影响 。 23.温度对酶活力影响有以下两方面:一方面 ,另一方面 。
24.脲酶只作用于尿素,而不作用于其他任何底物,因此它具有 专一性;甘油激酶可以催化甘油磷酸化,仅生成甘油-1-磷酸一种底物,因此它具有 专一性。 25.酶促动力学的双倒数作图(Lineweaver-Burk作图法),得到的直线在横轴的截距为 ,纵轴上的截距为 。
26.磺胺类药物可以抑制 酶,从而抑制细菌生长繁殖。 27.判断一个纯化酶的方法优劣的主要依据是酶的 和 。
28.维生素是维持生物体正常生长所必需的一类_________有机物质。主要作用是作为_________的组分参与体内代谢。
29.根据维生素的____________性质,可将维生素分为两类,即____________和____________。 30.维生素B1由__________环与___________环通过__________相连,主要功能是以__________形式,作为____________和____________的辅酶,转移二碳单位。 31.维生素B2的化学结构可以分为二部分,即____________和____________,其中____________原子上可以加氢,因此有氧化型和还原型之分。
32.维生素B3由__________与_________通过___________相连而成,可以与
__________,_________和___________共同组成辅酶___________,作为各种____________反应的辅酶,传递____________。
33.维生素B5是_________衍生物,有_________,_________两种形式,其辅酶形式是________与_________,作为_______酶的辅酶,起递______作用。
34.生物素可看作由____________,____________,____________三部分组成,是____________的辅酶,在____________的固定中起重要的作用。 35.维生素B12是唯一含____________的维生素,由____________,____________和氨基丙酸三部分组成,有多种辅酶形式。其中____________是变位酶的辅酶,____________是转甲基酶的辅酶。
36.维生素C是____________的辅酶,另外还具有____________作用等。 (四)选择题
1.酶的活性中心是指:
A.酶分子上含有必需基团的肽段 B.酶分子与底物结合的部位
C.酶分子与辅酶结合的部位 D.酶分子发挥催化作用的关键性结构区 E.酶分子有丝氨酸残基、二硫键存在的区域 2.酶催化作用对能量的影响在于:
A.增加产物能量水平 B.降低活化能 C.降低反应物能量水平 D.降低反应的自由能 E.增加活化能 3.竞争性抑制剂作用特点是:
A.与酶的底物竞争激活剂 B.与酶的底物竞争酶的活性中心
C.与酶的底物竞争酶的辅基 D.与酶的底物竞争酶的必需基团; E.与酶的底物竞争酶的变构剂
4.竞争性可逆抑制剂抑制程度与下列那种因素无关: A.作用时间 B.抑制剂浓度 C.底物浓度
D.酶与抑制剂的亲和力的大小 E.酶与底物的亲和力的大小 5.哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度:
A.不可逆抑制作用 B.竞争性可逆抑制作用 C.非竞争性可逆抑制作用 D.反竞争性可逆抑制作用 E.无法确定 6.酶的竞争性可逆抑制剂可以使:
A.Vmax减小,Km减小 B.Vmax增加,Km增加 C.Vmax不变,Km增加 D.Vmax不变,Km减小 E.Vmax减小,Km增加
7.下列常见抑制剂中,除哪个外都是不可逆抑制剂: A 有机磷化合物 B 有机汞化合物 C 有机砷化合物 D 氰化物 E 磺胺类药物
8.酶的活化和去活化循环中,酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上:
A.天冬氨酸 B.脯氨酸 C.赖氨酸 D.丝氨酸 E.甘氨酸
9.在生理条件下,下列哪种基团既可以作为H+的受体,也可以作为H+的供体: A.His的咪唑基 B.Lys的ε氨基 C.Arg的胍基 D.Cys的巯基 E.Trp的吲哚基
10.对于下列哪种抑制作用,抑制程度为50%时,[I]=Ki : A.不可逆抑制作用 B.竞争性可逆抑制作用
百度搜索“77cn”或“免费范文网”即可找到本站免费阅读全部范文。收藏本站方便下次阅读,免费范文网,提供经典小说综合文库生物化学习题及答案(5)在线全文阅读。
相关推荐: