毕福钧,RRLC法与HPLC法在红参和西洋参人参皂苷含量测定中的分析(4)

红参和西洋参人参皂苷含量测定中的分析比较

4 6mm,2 m)整体柱,流动相为乙腈(A)-0 1%磷酸

溶液(B),梯度洗脱(0~4min,16%A 19%A;4~15min,19%A 20%A;15~17min,20%A 29%A;17~28min,29%A 40%A;28~29min,40%A 55%A;29~31

-1

min,55%A 60%A);流速:1 0mL min;柱温:25#;检测波长:203nm;进样量:10 L。3 4 RRLC色谱条件

采用AgilentZorbaxEclipse

XDB-C18(50mm 4 6mm,1 8 m)色谱柱,流动相为乙腈(A)-0 1%磷酸溶液(B),梯度洗脱(0~7 5min,19%A 20%A;7 5~8min,20%A 26%A;8~

12min,26%A 38%A;12~17min,38%A 60%A;

17~19min,60%A;19~19 5min,60%A 19%A;19 5~22min,19%A),流速1 0mL min;柱温:25#;检测波长:203nm;进样量:2 5 L。

3 5 系统适用性试验 在上述3个色谱条件下,理论板数按人参皂苷Rg1计,均不低于5000,人参皂苷Rg1与人参皂苷Re,以及人参皂苷Rb1与相邻组分色谱峰均达到完全分离,分离度大于1 5。表明3根色谱柱在上述各自的色谱条件下均可用于西洋参中人参皂苷Rg1、Re和Rb1的含量测定,结果见图2、表3

。

-1

图2 对照品(A、B、D、E、G、H)及西洋参样品(C、F、I)色谱图Fig2

Chromatogramsofreferencesubstances(A,B,D,E,G,H)andRadixPanacisQuinuefoliisample(C,F,I)

A、B、C.HPLC(DiamonsilC18) D、E、F.HPLC(MerckC18) G、H、I.RRLC(AgilentZorbaxEclipseXDB-C18)1.人参皂苷Rg1(ginsenosideRg1) 2.人参皂苷Re(ginsenosideRe) 3.人参皂苷Rb1(ginsenosideRb1)

表3 系统适用性比较

Tab3 Comparisonofsystemsuitability

tR/min

方法(method)

色谱柱(column)

人参皂苷Rg1(ginsenosideRg1)

HPLC

DiamonsilC18MerckC18

RRLC

AgilentZorbaxEclipse

XDB-C18

49 912 96 4

人参皂苷Re(ginsenosideRe)

50 813 86 8

人参皂苷Rb1(ginsenosideRb1)

61 222 511 8

分离度(resolution)

人参皂苷Rg1与人参皂苷Re(ginsenosideRg1andginsenosideRe)

1 521 951 65

人参皂苷Rb1与相邻组分(ginsenosideRb1and

close

together

component)

1 951 762 76

理论板数(按人参皂苷Rg1峰计)(numberofthetheo reticalplate,calculatedwithreferencetothepeakofgin senosideRg1)

818671314913004

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