《蚕病学》教案(3)

第二节质型多角体病 第三节 脓核病 第四节 病毒病的发病规律 第五节病毒病的防治 第 2 次课 4 学时

A 可外小组分组登记。 B 各班课代表信息登记。 C 课前提问：1 蚕病的种类？ 2 蚕体具有哪些防御性机构与机能？

根据学生回答概括上次课主要内容。 第二章病毒病

重点难点：

重点讲授各种病毒病的病原形态、病征、病变特点，识别诊断方法，病毒病的发病特点 及主要防治措施。难点为病毒的超微结构及对蚕儿的致病机理。 思考题：

1 血液型脓病蚕有那些共同症状？不同发育阶段蚕儿又有何不同症状？

2 胃肠型脓病和浓核病在病征和组织病变上有哪些异同点？识别诊断二者的主要依据 是什么？

3 病毒病中哪些病蚕蚕粪带毒具有极强的蚕座传染性？了解这一点在蚕病防治上有何 意义？

4 生产中为何强调要严格分批、提青、隔离淘汰弱小蚕？这在蚕病防治上有何生理意 义？

5 根据病毒病的发生流行规律，试给一个多发病毒病的养蚕户制定一个切实可行的防病 规划和措施。

概述

1912 年家蚕脓病病原（BmNPV）成为第一个昆虫病毒而被发现。

提问：什么是病毒？ 迄今已被发现12 个目的1600 余种昆虫可被不同病毒感染，这些病毒归属于16 个病毒 科。

家蚕病毒病是目前生产中最常见危害最重的一类疾病，其种类有：

1. 核型多角体病：由杆状病毒科的家蚕核型多角体病毒（BmNPV）寄生血细胞和体腔内各

11 种组织的细胞核，并形成多角体，故称之为核型多角体病。

2. 质型多角体病：由呼肠病毒科的家蚕质型多角体病毒（BmCPV）寄生中肠圆筒型细胞， 并在细胞质中形成多角体，故称之为质型多角体c2?病。

3. 脓核病：由细小病毒科的家蚕脓核病病毒（BmDNV）寄生中肠圆筒型细胞核中，不形成 多角体。

4.病毒性软化病：由细小RNA 病毒科的家蚕软化病病毒（BmFV）寄生中肠杯形细胞胞质 中，不形成多角体，但形成类似多角体的包涵物，称“封入体”简称IFV。此病亦称空头性

软化病。此病国内无，不详述。

第一节：核型多角体病（血液型脓病）

一、病原

家蚕核型多角体病毒（BmNPV）Bombyx mori Nuclear Polyhedrosis Virus 存在方式二种：NPV、NPB

（一）NPV：杆状病毒科、杆状病毒属，病毒粒子杆状，330×80nm，T87.5℃，双链DNA（dsDNA）；

具感染性，而病毒蛋白却无致病力。（抗原即主要是病毒蛋白部分）———电镜照片、模式 图 套膜（囊膜、发育膜、外膜）：脂质膜 膜 胶粒层（填充层） 衣壳（内膜）Pr NPV病毒核衣壳 髓核（dsDNA）

单粒包埋型（SEV）：一个套膜内只包含一个核衣壳。

多粒包埋型（MEV）：一个套膜内包含两个以上核衣壳。Bm多为SEV，有时一些组织器官

中出现MEV（受寄生部位、外界环境温度、25~28℃ 多形成SEV 33~35℃ MEV

不同寄生部位BmNPV中核衣壳数目变化

寄生部位血细胞、体壁上皮、气管上皮脑、脂肪、卵巢皮膜细 胞

丝腺、精巢皮膜细胞 SEV（%） 97~98 72~89 63 MEV（%） 2~3 11~28 37 （二）NPB

Bm被NPV感染后，在细胞核内形成结晶蛋白构成的多角体，其内包埋许多病毒粒子，

12 由于多角体蛋白的保护，NPV 对不良环境的抵抗力较强，而裸露的病毒（游离病毒）抵抗 力则弱。

1. NPB的大小、形态———显微镜照片 2~6μm，平均3.2μm，400×或600×光镜下易观察到。多为整齐的六角形十八面体，偶 有四方、三角或不正形。 其形态受下列因素的影响：

（1） 寄生部位：血细胞、气管上皮、体壁上皮、脂肪体中均六角形；而丝腺腺细胞中 则巨形三角形，多角体较其它组织大2×左右；睾丸、精巢内膜上寄生则四方形。 （2） 宿主：BmNPV 接种二化螟后，1 代六角形，7 代后四方形；再将四方形NPV 反 接种于Bm，则第1 代少量六角形，第4 代达70~80%，第六代全部为六角形。 （3） 与环境（温度）有关：BmNPV接种蛹体，接种后： 28℃ 24h →35℃ 则产生四角形NPB 28℃ 48~96h → 35℃ 六角形 35℃ 24~48h → 28℃ 六角形 35℃ 72~96h → 28℃ 四角形 2. NPB组成

NPB Pr 与宿主细胞Pr及病毒Pr均不同，分子量为28000，除3~5%的病毒粒子外，由 244 个AA 组成的多肽，0.3%的硅，微量铁、镁等元素，其中硅与NPB 外膜及骨架构成有 关。

3. NPB理化特性

六角形，淡绿色，折光强，比水重（沉于水底，观察时应注意调焦平面），不溶于水及 有机溶剂，对浓酸不稳定。弱碱可使NPB 溶解，放出NPV 粒子，强碱使NPB 溶解，NPV 失活；NPB对苏丹Ш不着色，据此可与脂肪球区别之。 4. NPB稳定性

NPV37.5℃ 1d失活；而NPB室温下，致病力保持2~3 年以上；4℃下，达20 年之久； 生产中消毒针对多角体。

二、病征——看图片讲解 本病各龄均有发生，多见于3 龄以后，尤以5 龄中期至老熟前后较多，病蚕多数不能吐 丝结茧。

（一） 病蚕共同症状（典型病症）

体色乳白，体躯肿胀，狂躁爬行，体壁易破，流乳白色脓汁而死。 （二） 不同发育阶段病症

1. 不眠蚕：各龄催眠期发病，体壁紧张发亮，体色乳白，节间膜高突，不食桑，爬动不 止，爬于蚕座四周坠地流脓而死。

2. 起节蚕：各龄起蚕发病，体色乳白，体壁松弛多皱，体躯缩小，前节节间膜向后节套 叠，饷食1~2天，体躯反而缩小。

3. 高节蚕：4—5 龄盛食期发病，节间膜高突，形如竹节，症状同不眠蚕。

4. 脓蚕：五龄后期至上蔟前发病，体壁紧张，体色乳白，环节中央拱起，如算盘珠状，

13 生产中较为常见。

5. 斑蚕：3~4 龄将眠期发病，在腹足、气门周围、背腹部等处出现对称黑色大病斑（焦脚、 黑气门等），少见。 （三） 蛹期症状

5 龄后期感染，可部分营茧化蛹，病蛹体色稍乳白，易破，经震动，即流脓汁而死，极 少存活到蛾。

三、病变———照片讲解 NPV→感染血细胞→核内形成NPB→增大、增殖→胞核膨胀→细胞膨大破裂→NPB、 NPV及细胞碎片游离于血液中→造成代谢障碍

组织病变以血液最明显，血液浑浊，乳白色，似牛奶；其它组织如气管上皮细胞、脂 肪组织、体壁真皮细胞等可在光镜下观察到核膨大，有多角体等病变。

四、发病经过（致病机理） 1. 病原感染入侵——示意图 污染桑叶碱液溶解RFP

NPB 蚕食下肠腔放出NPV 灭活排出

创伤胞核定位

NPV 血液 NPV 复制中肠上皮细胞

细胞间隙

血细胞核定位 2. 复制

复制DNA聚合酶装配

ssDNA dsDNA （病毒粒子）NPV dsDNA 转录回核内翻译

mRNA（多种） 胞质rRNA+tRNA、核糖体衣壳 NPB

（宿主） 病毒Pr

另一部分mRNA 胞质多角体Pr 回核内

3. 增殖

NPV的增殖与蚕品种、饲育温度等有关，总的可分为四个阶段：隐潜期、缓慢增殖期、 高速增殖期及稳定增殖期。

五、发病特点——归纳总结 1. 本病以食下传染为主（NPB），也可经伤口感染（NPV）。

2. 该病病蚕的血液（脓汁）具强烈的传染性，是该病最主要的传染源。 3. 本病主要发生在3 龄至老熟或蛹期，尤其是5 龄中期至老熟前后。

4. 本病属亚急性传染病，小蚕感染后经3~4天发病死亡；大蚕经4~6 天发病，外温高时， 病程加快。

围食膜

5. 病蚕体壁破裂流脓之前，蚕座2 次感染的可能性较小（故发现病蚕及时捡出，可有效

14 控制传染）。

6. 由于NPB 对自然环境具强的抵抗力，故该病原除水平传播外，尚具较强的垂直传播 能力。

7. 恶劣环境条件及一些理化因素刺激可诱发本病。 8. 不同蚕品种对本病抗性不同。（微效多基因控制）

六、诊断

1. 肉眼：据典型病症；开始时迟眠蚕，剪尾角或腹足，滴出血液呈乳白色。 2. 显微镜：检血液，查NPB；（苏丹Ш、有机溶剂法） 脂肪球为红色或橙黄色在酒精、乙醚中溶解消失

观看核型多角体病录象！ 第二节 质型多角体病（中肠型脓病）

一、病原

家蚕质型多角体病毒（BmCPV）。 Bombyx mori Cytoplasmic Polyhedrosis Virus 存在方式：CPV、CPB。 （一）CPV——电镜照片 本病毒属呼肠病毒科，质型多角体病毒类群。

CPV 呈球形，直径60~70nm，超微结构为六角形二十面体，有十二个顶点，各顶点有 一衣粒，每衣粒向外伸出一长度25~27nm 的四节组成的突起，突起顶端有一直径12nm 的 球状体。有两层正二十面体的衣壳，内壳中心为病毒髓核。

病毒核酸为dsRNA，分子量14.6×106u，Tm为80℃。dsRNA5?末端有甲基化帽子结构， 借助BmCPV 自身的转录酶可转录成含有甲基化5?末端的mRNA，70 年代初的此发现在分 子生物学与分子遗传学上具有普遍意义。现已证明，所有真核生物的mRNA 都有5?甲基化 帽子结构，是核糖体小亚基的识别位点，对真核细胞内转译起始作用具有关键意义。 （二）CPB——光镜照片 1. 形态与大小

常见为六角形二十面体，其次为四角形六面体，变异型较多，还有三角形、五角形、 杆状、不正形等。六角形多角体为0.5~10μm，平均2.62μm；大小开差悬殊，可差20 倍，四方形较六角形稍大。 多角体大小受许多因素影响：

（1）环境温度：25~28℃较大，>30℃则较小。 （2）寄生部位：中肠前部较大，后部较小。

（3）蚕体生理状况：饱食形成的多、大；饥饿下形成的少、小。 2. 一般理化特性

折光性较强，比水重，不溶于水及有机溶剂，易溶于碱性溶液，与NPB不同的是CPB 易被染色（除孚根氏反应呈阴性（不着色）），和焦宁—甲基绿染色NPB 绿

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