1.酶的活性是指酶 一定化学反应的能力,其高低用一定条件下酶所催化的某一化学反应
的 来表示。酶反应速度用 内, 中反应物的 量 或产物的 表示。
2.常影响酶活性的因素的是 、 和酶的抑制剂等。低温只 酶的活性,在一
定范围内升高温度酶的活性会 ,高温、过酸、过碱对酶活性的影响是 ,即再降低温度或恢复到最适PH,酶的活性 也不再恢复 。
3. 探究温度和pH对酶活性的影响及探究果胶酶用量的两个实验都要注意实验的基本原则:对照 原则和 原则。在两个实验中,自变量分别是 ,因变量是 或者是 。除了酶的用量以外,影响该实验的因素还有:温度、PH、 、和果泥的用量。
生物选修一基础知识填空测试(5)
一.凝胶色谱法
(1)概念:凝胶色谱法也称作_ _,是根据_ _分离蛋白质的有效方法。 (2)原理:大多数凝胶是由_ __构成的小球体,内部有许多贯穿的通道,当不同的蛋白质通过凝胶时, 的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程_ ____,移动速度_ __;而_ _的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在_ __移动,路程_ ___,相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离,即分子质量大的蛋白质、分子质量中等的蛋白质和分子质量小的蛋白质洗脱出来的先后顺序为 最先洗脱出来、 第二洗脱出来, 最后被洗脱出来。 二.缓冲溶液
(1)作用:在一定范围内,缓冲溶液能抵制_ _对溶液_ ___的影响,维持pH基本不变。 (2)配制:通常由1-2种___ _溶解于水中配制而成,调节缓冲剂的_ 就可以制得 缓冲液。 三.电泳
(1)概念:带电粒子在 的作用下发生 的过程。
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(2)原理:许多重要的生物大分子,如_ _____、_ __ ___等都具有__ ______的基团,在一定pH下,这些基团会带上___ __或__ _____。在电场的作用下,这些带电分子会向着_ __移动。电泳利用了分离样品中各种分子_ __以及分子本身的_ ____、_ __不同,使带电分子产生不同的__ _,从而实现样品中各种分子的分离。 四.蛋白质提取分离一般分为_ _、_ _、_ 、___ _。 五.实验操作 I.样品处理
实验选取的是 红细胞为材料,原因是 , 血红蛋白由_ _ __肽链组成,包括两个__ _ ___和两个_ _ _____。每条肽链环绕一个_ ___基团,此基团可携带_ __或__ __。血红蛋白因含有 而呈现_ ____ ___。 (1)红细胞的洗涤
①目的:去除 。
②方法:_ _____离心,如500 r·min
?1离心2 min,然后用胶头吸管吸出上层透明
的_ ____,将下层_ _____的红细胞液体倒入_ ____,再加入五倍体积的_ _,缓慢搅拌_ __ _,低速短时间离心,如此重复洗涤_ _次,直至上清液中没有_ _____,表明红细胞已洗涤干净。
(2)血红蛋白的释放:将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加_ _到原血液的体积,再加40%的_ _,置于_ 上充分搅拌10 min。该步骤的目的 。 (3)分离血红蛋白溶液:将搅拌好的混合液离心后可观察到试管中溶液分为4层。
第1层:_ ___ 的甲苯层
第2层:__ _的沉淀层——_ ____薄层固体 第3层:_ _____的水溶液——_ _透明 第4层:其他杂质的_ _______色沉淀物
将液体用_ ____过滤,除去_ __,于_ ___中静置片刻后,分出下层的_____ _液体。 (4)透析
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①过程:取1 mL的__ __溶液装入_ __中,将其放入盛有300 mL的20 mL·L的_ _____中(pH = _____),透析12 h。
②原理:透析袋能使 自由进出,而将 保留在袋内。
③目的:可以除去 ,或用于 测定( 蛋白质相对分子质量 )通常用十二烷基硫酸钠(SDS)—聚丙稀酰胺凝胶电泳
?1蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于 等因素。 为了消除 对迁移率的影响可以在凝胶中加入( SDS )。SDS能使蛋白质发生完全变性。由几条肽链组成的蛋白质复合体在SDS的作用下会解聚成 ,因此测定的结果只是 单条肽链的 。SDS能与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有电荷量。因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于 。 凝胶色谱操作 (1)凝胶色谱柱的制作 ①柱底部的制作
a.选择合适的橡皮塞,中间打孔。
b.在橡皮塞顶部切出锅底状__ ____,在0.5 mL的_ ___头部切下_ ____长的一段,插入橡皮塞孔内,上部不得超出橡皮塞的凹穴底面。
c.剪尼龙网小圆片覆盖在_ 上 。用_ _的尼龙纱将橡皮塞___ 包好,插到玻璃管一端。
d.色谱柱下端用移液管头部作_ _,连接一细的_ ___,并用_ 控制尼龙管的_ ____与__ _____,另一端放入收集_ _____的收集器内。 ②柱顶部的制作:插入安装了玻璃管的橡皮塞。 (2)凝胶色谱柱的装填
①填充材料:交联葡聚糖凝胶。
②方法:凝胶用_ ___充分溶胀后,配成_ __,在与色谱柱下端连接的尼龙管打开的情况下,一次性缓慢倒入_ ____。注意色谱柱内不能有 存在,一旦发现,色谱柱必须 装填完后,立即连接_ ___,在_ __高的操作压下,用300 mL的20
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mol·L
?1的磷酸缓冲液充分_ _____平衡凝胶12 h,使凝胶装填_ _____。
(3)样品的加入和洗脱
①加样前:打开流出口,使柱内凝胶面上的_ ____下降到与_ __平齐,关闭出口。 ②加样:用_ __将1 mL_ ____的样品加到色谱柱的_ _____。
③加样后:打开_ ____,使样品渗入凝胶床内,等完全进入后,关闭下端出口。小心加入缓冲液到_ ______,连接缓冲液洗脱瓶,打开下端出口,进行洗脱,待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每______收集一管,连接收集。
Ⅲ.SDS--聚丙烯酰胺凝胶电泳判断 的蛋白质是否达到要求,需要进行蛋白质的鉴定。在血红蛋白的分离中,其分离成功的标志 。
生物选修一基础知识填空测试(6)
1. 胡萝卜素是 ,化学性质比较 ,不溶于水,微溶于 ,易溶
于 等有机溶剂。根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为 三类。 是其中最主要的组成成分。与β-胡萝卜素化学结构类似的胡萝卜素约有100多种,它们大多存在于蔬菜中。 等蔬菜是提取天然β-胡萝卜素的原料。
2.工业生产上,提取天然β-胡萝卜素的方法主要有三种,一是从 中提取,二是从 中获得,三是利用 生产。本课题所提供的方法只能提取胡萝卜素的 ,若要获得β-胡萝卜素,还需要进一步的 。
3.提取胡萝卜素的萃取剂的选择:① 、② 、③ 、 ④ 。影响萃取的因素有① 、② 、③ 、 ④ ;萃取的过程:胡萝卜
胡
萝卜素;萃取时避免明火加热的原因是 ;为防止有机溶剂的挥发,还要在加热瓶口安装 。
4.乙醇和丙酮能够用于胡萝卜素的萃取吗?为什么?: 5.比较水蒸气蒸馏法、压榨法和有机溶剂萃取法在实验原理、方法步骤及适用范围方面的异同,并分析这三种方法的优点和局限性。
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提取方法 水蒸气 实验原理 利用 将挥发性较强的芳香油携 方法步骤 1.水蒸气蒸馏 适用范围 适用于提取 油、薄荷油等2. 挥发性 的芳香油 3.除水过滤 1. 浸泡,漂洗 适用于 、柠檬等 2.压榨、过滤、静置 易 原料的提取 3.再次 蒸馏 带出来 通过 ,压榨压榨法 出果皮中的芳香油 使芳香油溶解 有机溶 在 溶剂中,蒸剂萃取 1.粉碎、 2 , . 适用范围 ,要求原料的颗粒 ,能充分浸泡在有机溶液中 发后就可得到芳香油 3.
6、在胡萝卜的鉴定当中常运用的方法是 ,其原理 ,溶解度高在滤纸上扩散的 ;鉴定的具体步骤是:① 、② 、③ 点样 、④ 、⑤ ,点样时圆点的要求是 ,层析液不能没及圆点的原因是 ;在层析时色谱容器密封的原因是 。
生物选修一真题集锦
1.回答下列关于腐乳制作的问题:
(1)腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程,其中起主要作用的微生物是 ,其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为 和 ;其产生的 能将豆腐中的脂肪水解为 和 。 (2)发酵完成后需加盐腌制,加盐还可以抑制 生长。
(3)腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐作用外,还能使腐乳具有独特的 。
2.乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为:
玉米秸杆 预处理、水解 糖液 10 发酵 酒精
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