Type:选择检测孔的类型,有Empty、Blank、Assay Control、Sample、Sample Control、Standard等可供选择。在下拉框中选择想要定义的孔的类型,然后在下方空白的模式96孔板中进行点击排布。 Replicates:
Number输入样本的重复数。
Horz or Vert 选择重复样本的排列方式,横排还是竖排。 Auto Select:
Next ID 样本编号自动递增 Next Dil 稀释浓度自动递增。 Filling:
Horz or Vert 选择不同样本间的排列方式,横排还是竖排。
在Standard中,除了要进行排布以外,还需要进一步输入标准品的浓度和稀释关系。
Incr:表示每点之间+多少浓度 Fact:表示每点之间×多少倍浓度
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布好的平板图如下:
实验不同酶标板的排布也不尽相同,实验人员应按照实验的需求对酶标板进行排布。当样品排布好之后点击OK,向导精灵提示这一步结束进入下一步。
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,点击Next
第三步:数据分析设臵
双击Data Reduction下方的彩色图标
进入数据分析设臵界面,该界面为您提
供Transformation、Well Analysis、Curve Analysis、Cutoff、Validation、Polarization 几个功能模块可供选择。
1 Transformation:双击
按钮,出现Transformation设臵界面
Data In :选择下拉列表中选择要进行赋值的数据,如果有多个数据需要,点击
下方 按钮,进行多重的赋值
New Data Name:输入公式计算后数据输出所用的名称
Formula:输入需要计算的公式,如上图:分别读取390和540的吸光度值,
别将这两种数据赋值为DS1和DS2,公式计算DS1/DS2,将计算值 Gene Company Limited 基因有限公司 18
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命名为Ratio。如果公式适用于所有孔,则勾选 Use single formula for all wells, 则所有的孔都进行相应的公式计算;如果只对单独的孔进行计算,则不需勾选Use single formula for all wells,输入公式后双击下方的96孔板示意图中相应的孔,公式自动对相应孔进行计算。选择Deference Between Rows或Deference Between Column
可以进行行间或列间的差值计算。
Gene5同时提供了多重公式计算的功能,如果你还需要对全部的样
品或部分样品进行公式计算,则可以再次双击
按钮,进行
再一次的赋值计算,直到完成全部计算任务。点击OK保存设臵。
2 Curve Analysis:双击
按钮,进入曲线分析界面
Curve Name:输入曲线的名称
Data In:选择曲线中X、Y轴相对应的数值
Curve Fit:Curve Fit Method 选择曲线类型;X Axis Data 、Y Axis Data:选择轴的线性关系lin 或者log;Extrapolation Factor:外推因子,对超出标准浓度的样本进行推算
Data Out:Concentrations 定义计算值的名称;Interpolations在该对话框内。您可以定义最多25个Y值(公式、数字),其对应的X值(浓度)就会被计算出来,并显示在标准曲线上。每次设臵结束点击OK保存设臵 3 Cutoff:双击
图标,进入临界值设定界面
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Data In 选择要进行分类的数据。 Symbols 输入分类显示的标识。
Cut-offs 输入临界值,临界值可以是数字,也可以是公式或者孔符号。但是必须是升序排列。进行分类的数据首先和第一个分类的标准(1.6)进行比较,如果小于第一临界值就表示为LOW,如果大于等于第一个临界值则表示为“HIG”,其他依次类推,可以设定不同级别的分类标准。 4 Validation:双击
图标,进入检验值设臵界面
Validation是一系列的判断标准,用来评估获得的数据是否适宜进行后面的计算,Gene5可定义多达50个检验标准。读板完成后,查看每个检验标准的检验情况(根据实验结果在以下三个对话框中填入信息):Valid Text 条件匹配 Invalid Text 条件不匹配,计算的结果可信度不高。Unable to Evaluate Text 如果选择的数据不能确定时,可能会出现这种情况。设臵成功后点击OK,向导精灵提示这一步结束,点击Next进入下一步。
软件提示你选择对得到的结果进行何种方式的输出,根据需要进行选择
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