2013上期给排水微生物学实验安排及实验指导(2)

2.培养基：营养琼脂面培养基 3.染色液：

① 革兰氏一液：1%结晶紫酒精溶液。 ② 革兰氏二液：路哥氏碘液。 ③ 革兰氏三液：95%酒精溶液。

④ 革兰氏四液：2.5%蕃红酒精溶液。

4.器材：显微镜 台灯 酒精灯 接种环等

四、实验操作步骤

1．制片：取二块干净的载玻片，在其中内各加一小滴蒸馏水，以无菌操作规程分别挑取大肠杆菌和枯草杆菌少量，涂布于对应的载玻片上与水混匀，涂成极薄的菌膜。自然干燥后再通过酒精灯进行热固定。

2．初染：于菌膜上滴加结晶紫染液，以盖满菌膜为宜，染色1分钟后倾去染液，用蒸馏水轻轻冲洗至流下无色为止，甩去载玻片上的残余水。

3．媒染：滴加碘液染色1分钟，用蒸馏水冲洗干净。 4．脱色：滴加95%酒精液脱色30秒钟（准确计时），用蒸馏水冲洗干净。 5．复染：滴加蕃红液染色1分钟，用蒸馏水冲洗干净最后自然干燥。 6．镜检：

五、实验结果记录

1．镜检：在显微镜油镜头下观察大肠杆菌被染成 色，枯草杆菌被染成 色。 2．结论：大肠杆菌属于革兰氏 菌，枯草杆菌属于革兰氏 菌。

六. 实验结果分析及问题讨论

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