2013上期给排水微生物学实验安排及实验指导

给排水微生物学实验安排

实验班级 给排水10—1班 实验时间 2013年5月5日星期天 上午8：30 实验地点 工科三号楼A512 实验内容 1）光学显微镜的使用及各种水处理微生物个体形态的观察 2）细菌的革兰氏染色制片技术及形态观察 实验班级 给排水10—2班 实验时间 2013年5月5日星期天 下午1：30 实验地点 工科三号楼A512 实验内容 1）光学显微镜的使用及各种水处理微生物个体形态的观察 2）细菌的革兰氏染色制片技术及形态观察

实验要求：

1）每次实验请大家带好环境工程微生物学理论书及实验指导。 2）每次实验前请大家做好实验预习及报告。 3）每次实验请大家带好铅笔及橡皮。

4）每次实验完成后请大家各自将实验操作台面清理干净后，将手洗干净后离开实验室。

微生物学实验室守则 微生物学实验课的目的是：训练学生掌握微生物学最基本的操作技能；了解微生物学的基本知识；加深理和巩固对自学和讲课内容的理解。通过实验不仅可以培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的能力；实事求是、严肃认真的科学态度，以及良好的合作精神，同时也有宜于培养勤俭节约、爱护公物的良好作风。 为了上好微生物学实验课，并保证安全，特提出如下注意事项： 1、每次实验前必须对实验内容进行充分预习，以了解实验的目的、原理和方法，做到心中有数，思路清楚。 2、认真及时做好实验记录，对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需记下每次观察的现象和结果，以便分析。 3、实验室内应保持整洁、勿高声谈话和随便走动，保持室内安静。 4、实验时小心仔细，全部操作应严格按操作规程进行，万一遇有盛菌试管或瓶不慎打破、皮肤破伤或菌液吸入口中等意外情况发生时，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。 5、实验过程中，切勿使酒精、乙醚、丙酮等易燃药品接近火焰。如遇火险，应先关掉火源，再用湿布或沙土掩盖灭火。必要时用灭火机。 6、使用显微镜或其他贵重仪器时，要求细心操作，特别爱护，使用完后做好仪器的使用登记.对消耗材料和药品等要力求节约，用毕后仍放回原处。 7、每次实验需进行培养的材科，应标明自己的组别及处理方法，放于教师指定的地点进行培养：实验室中的菌种和物品等，未经教师许可，不得携出室外： 8、每次实验完毕后，必须把所用仪器抹净放妥，及将自己所用的玻璃仪器洗干净，然后将实验室收拾整齐。擦净桌面，如有菌液污染桌面或其他地方时，可用3%来苏尔液或5%石炭酸液覆盖其上半小时后擦去。如系芽孢杆菌，应适当延长消毒时间：凡带菌之工具(如吸管、玻璃刮捧等)在洗涤前须浸泡在3%来苏尔液中进行消毒： 9、每次实验的结果,应以实事求是的科学态度填入报告表格中，力求简明准确，并连同思考题及时汇交教师批阅： 10、离实验室前一定要用肥皂将手洗净，注意关闭门窗、灯、火、煤气等。 实验报告的撰写要求 实验报告是反映学生实验过程和总结分析实验结果的主要形式，也是确定学生实验成绩的重要依据之一，必须以实事求是、严肃认真的科学态度，按照指导书的要求按时完成。实验报告应该简明扼要、叙述准确、数据完整、绘图清晰且写实，应有讨论、有分析，结论明确。 一般应包括以下一些内容：1.实验项目名称；2.实验目的； 3.实验原理；4.实验仪器及材料；5.实验操作流程及说明；6.实验结果记录及处理；7.实验结果与讨论等。

实验一 光学显微镜的使用及各种水处理微生物个体形态观察

一、实验目的和要求

1）了解显微镜的构造及成像原理。

2）掌握显微镜的使用方法和保养方法。

二、显微镜的构造

普通的光学显微镜由机械裝置和光学系统两大

部分组成，如下图所示：

1.镜座 2.载物台 3.镜臂 4.棱镜套 5.镜筒 6.接目镜 7.转换器 8.接物镜 9.聚光镜 10.彩虹光圈 11.光圈固定器 12.聚光器升降螺旋 13.光源 14.细调旋纽 15.粗调旋纽 16.标本夹

显微镜构造示意图

（一）机械裝置部分：

1）镜座：是显微镜的支架，由底座和镜臂组成。

2）载物台：又称镜台，用于安放载玻片，其上安有玻片夹和玻片移动器，调节移动器

上的螺旋可使载玻片前后左右移动。镜台中央有一孔，称通光孔，可使反光镜上的光反射到物镜中来。

3）镜筒：是空心的园筒，长度为160毫米，用于调整显微镜的长度和总的放大倍数，其上端连接目镜，下端连接转换器。

4）转换器：其上安装三个物镜，镜检时旋转转换器即可换物镜头。注意转换物镜时。必须用手按住园盘旋转，勿用手指直接推动物镜，以免使物镜与转换器之间的螺纹松脱而损坏显微镜。

5）调焦裝置：包括粗细调焦旋钮，是调节镜筒上下移动的裝置。 （二）光学系统部分：

1）物镜：又称为镜头。有三个物镜头，二个干燥系物镜，一个油系物镜。物镜上标有主要参数，其含意是：例如：上排100/1.25是放大倍数为100，数值口径为1.25，下排160/0.17是指镜筒长为160毫米，盖玻片的厚度小于0.17毫米。它是显微镜的最重要的部分。

普通显微镜接物镜的工作原理 2）目镜：供眼睛观察物像用的，它将物镜放大的物像再放大，配有三个目镜，其上标有放大倍数。显微镜的总放大倍数是目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积.

3）聚光器：起聚集光线的作用，它可上下移动以调节最适光度。其下方安装有可变

光圈,用以调节光的强度。

4）反光镜：安装在镜座上。它是一个有平凹两个面的双面镜。其作用是采集外来光

线，并且送入聚光器，一般采集自然光时用平面镜，采集人工光源时用凹面镜。

三.实验材料和器材

显微镜 台灯 二甲苯 擦镜纸 霉菌固定片等。

四.实验操作步骤

（一）显微镜的使用方法：

1.准备工作：取出显微镜时，应一手握镜臂,一手托镜座，轻拿轻放，切忌碰撞和猛震。显微镜应放在离桌边60毫米左右的位置。再将登子的高低调节好，不得将显微镜倾斜。 2.采光：将低倍镜与镜筒调节成一条直线，用双眼向下看，同时调节反光镜寻找光源。直至全视野有均匀的明亮度，效果最佳为至。也可同时调节聚光镜和光圈。

3.放置标本：上升镜筒，将标本片放在载物台上，用玻片夹夹住，把标本移动至中央孔的位置。

4.调焦：眼睛看着低倍镜头，缓慢转动粗调旋钮，使低倍物镜头下端接近于玻片。再用左眼看目镜，慢慢调节粗调旋钮使镜筒上升（此时切勿向下调节，以防损坏物镜头），当看到模糊物像时，再转动细调旋钮，直至看到清晰图像为止。

5.转高倍镜观察：用手按住转换器，慢慢地旋转，当听到“咔嚓”一声即表明物镜已转到正确位置上，再稍微调节一下细调旋钮就可看到清晰图像。这是因为显微镜的成套物镜设计为共焦点。

（二）显微镜的保养： 1.上升镜筒，取下玻片。

2.清洁镜筒，用擦镜纸擦净用过的物镜和目镜，如发现擦不净时，用擦镜纸沾少许二甲苯擦净，最后用干净的擦镜纸擦去残余的二甲苯，放入镜头盒内收好。 3.清洁：擦净显微镜的其它部位。

4.将显微镜的物镜转成八字形，缓慢下降镜筒，使物镜搁在镜台上，反光镜转成垂直状，聚光镜降至最低位置，经老师检查合格，最后把显微镜放入箱内收好。

五.实验结果记录

绘制出你所看到的标本图（要求注明放大倍数、及各部位名称） 六. 实验结果分析及问题讨论

实验二 细菌革兰氏染色及形态观察 一、实验目的和要求

学习细菌的革兰氏染色的原理和方法。

二、实验原理

革兰氏染色法可将细菌氏分别革兰氏阳性菌（G＋）和革兰氏阴性菌（G－）两大类，是细菌学上最常用的鉴别性染色法。

革兰氏染色是使用几种不同的染料对细菌进行染色。先进草酸结晶紫初染，次经碘液媒染，再用95%酒精脱色处理，最后用蕃红液复染。如果细菌能保持结晶紫—碘复合物的颜色而不被酒精脱色，则菌体呈兰紫色，为革兰氏阳性菌。如果细菌体内的结晶紫—碘复合物的颜色被酒精脱去，而复染上蕃红的颜色，则菌体呈红色，为革兰氏阴性菌。

此染色法之所以能将细菌区为G＋和G－两类，是由于这两类菌的细胞壁成分不同所决定的。G－菌的细胞壁较薄，含有的脂类物质较高，肽聚糖的含量较低，酒精处理时溶解了脂类物质，使细胞壁穿孔，通透性增大，在水洗时将细胞内原有的结晶紫—碘复合物冲走而脱色，再用蕃红复染就被染成了红色。G＋菌由于细胞壁厚，其中含有肽聚糖的量高，脂类含量低，用酒精处理时，使细胞壁脱水，肽聚糖层的孔眼缩小，通透性降低，结晶紫—碘复合物被色在细胞内，而不会在水洗时被冲走，所以在复染时蕃红染液进不去，菌体最终仍呈兰紫色。

＋

－

三、实验材料和器材

1.菌种：大肠杆菌和枯草杆菌

2.培养基：营养琼脂面培养基 3.染色液：

① 革兰氏一液：1%结晶紫酒精溶液。 ② 革兰氏二液：路哥氏碘液。 ③ 革兰氏三液：95%酒精溶液。

④ 革兰氏四液：2.5%蕃红酒精溶液。

4.器材：显微镜 台灯 酒精灯 接种环等

四、实验操作步骤

1．制片：取二块干净的载玻片，在其中内各加一小滴蒸馏水，以无菌操作规程分别挑取大肠杆菌和枯草杆菌少量，涂布于对应的载玻片上与水混匀，涂成极薄的菌膜。自然干燥后再通过酒精灯进行热固定。

2．初染：于菌膜上滴加结晶紫染液，以盖满菌膜为宜，染色1分钟后倾去染液，用蒸馏水轻轻冲洗至流下无色为止，甩去载玻片上的残余水。

3．媒染：滴加碘液染色1分钟，用蒸馏水冲洗干净。 4．脱色：滴加95%酒精液脱色30秒钟（准确计时），用蒸馏水冲洗干净。 5．复染：滴加蕃红液染色1分钟，用蒸馏水冲洗干净最后自然干燥。 6．镜检：

五、实验结果记录

1．镜检：在显微镜油镜头下观察大肠杆菌被染成 色，枯草杆菌被染成 色。 2．结论：大肠杆菌属于革兰氏 菌，枯草杆菌属于革兰氏 菌。

六. 实验结果分析及问题讨论

百度搜索“77cn”或“免费范文网”即可找到本站免费阅读全部范文。收藏本站方便下次阅读，免费范文网，提供经典小说综合文库2013上期给排水微生物学实验安排及实验指导在线全文阅读。