多糖分离纯化的基本原则和方法(2)

化糖蛋白的方法。这一方法简单易行，在温和条件下进行不破坏糖蛋白活性。固定化的刀豆凝集素（concanavalin A，Con A）是应用最普遍的固定化凝集素。Con A能专一地与甘露糖基结合，各种的酶如α-和β-半乳糖苷酶、过氧化氢酶、干扰素等都可用固定化Con A纯化。

8.膜分离法

膜分离具有无相变及化学变化、可常温操作、选择性高与能

耗低等优点。如马尾藻多糖就采用了膜分离纯化技术。海藻多糖是一类组成相当复杂的生物大分子，使用膜分离技术对海藻多糖[8]进行分级可达到初步纯化的目的。在压力0．5MPa， 温度20℃条件下， 将脱蛋白之后的提取液稀释至1 L， 先用孔径0．1 μm 的微滤膜过滤，分成浓缩液和透过液，将透过液依次用截留分子量为100、50、10、3kD 的超滤膜进行超滤，分别收集浓缩液和透过液。 近20 年来, 由于分子生物学的发展, 人们逐渐认识到糖及其复合物分子具有极其重要的生物功能, 快速高效、节省能源、简便易行的提取与纯化工艺对多糖的研究有重要意义。多糖在自然界植物中广泛存在，但由于其种类的多样性、结构组成的复杂性以及多糖分子量大、极性大等特点，给植物多糖提取、分离带来很大困难，要想获得较高的多糖提取率，用单一的提取方法不一定能取得理想的效果，将2种或者多种提取方法结合可能得较好的提取效果[9]。

在多糖的分离、纯化中常用分级沉淀法、纤维素柱色谱法和凝胶色谱法相结合的方法进行分离、纯化，使多糖的分离、纯化能达到理想的效果。目前较为常用的提取与纯化技术比较成熟, 但存在溶剂、能源消耗大且效率不高的问题, 合理使用一些新技术可以有效改善提取与纯化效果, 使多糖制备向高效节能的方向发展; 不断探索和完善的提取与纯化技术, 将会使多糖制备向绿色、现代化的方向发展。多糖的提取分离纯化方法在不断更新，在选取方法时，应当关注目标多糖的性质、特点，综合比较进行实验，才能选取最佳的方法和工艺。

参考文献

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[10]吴梧桐《生物化学》第六版

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