考马斯亮蓝(Bradford)法蛋白浓度测定试剂盒(5)

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考马斯亮蓝(Bradford)法蛋白浓度测定试剂盒

考马斯亮蓝(Bradford)法蛋白浓度测定试剂盒 M2031 产品说明书

11. 标准品曲线配制时，如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准曲线相关系数减小，可根

据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制，或者使用精确度高的加样枪。 12. 由于 Bradford 法在蛋白浓度增高到一定时候，颜色反应并不成比例增加，因此得到的标准

曲线只是在一定范围内可以近似看成直线，每次应按照实际测得的标准曲线计算出相对精确的蛋白浓度。 13. 需要酶标仪一台，最佳检测波长为 595nm，也可以在570～610nm 之间波长测定，但会降低

一些灵敏度。并需96 孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。 14. 不像其它一些蛋白浓度测定方法（包括 Lowry 法），Bradford 法测定蛋白浓度不受绝大部

分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二流苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS 低于0.125%,Triton X-100 低于0.125%，Tween 20 低于0.06%，可以考虑用超纯水稀释，透析/除盐，ACETONE/TCA 沉淀蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。含去垢剂的样品推荐使用Mbchem 的BCA 蛋白浓度测定试剂盒（Mbchem M3020）。