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考马斯亮蓝(Bradford)法蛋白浓度测定试剂盒(3)

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考马斯亮蓝(Bradford)法蛋白浓度测定试剂盒

考马斯亮蓝(Bradford)法蛋白浓度测定试剂盒 M2031 产品说明书

8. 根据测得的吸收值,在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。

9. 计算蛋白浓度:以查得的蛋白含量除以样品体积10μl,再乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。

B. 比色皿测定:

1. 根据需要从冰箱取出适量Bradford 2x 染色液,平衡至室温并混匀;预热酶标仪20分钟。

2. 根据需要取适量标准品,加入去离子水稀释至1mg/ml(原液5mg/ml),并混匀。

注意:原则上蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可

以用去离子水、0.9%NaCl或PBS稀释标准品。稀释后的蛋白标准品也可以-20℃长期保存。以下步骤中均默认采用去离子水,可以根据条件选择使用稀释液。

10. 标准曲线绘制。取8个比色皿分别编号为A-H,按以下表格数据加入试剂:(此方案工作线

性范围为100-1000ug/ml。)

3. 振荡混匀后,室温放置 5-10 分钟。

4. 用分光光度计测定595nm处的吸光值,以不含BSA 的光吸收值为空白对照。 5. 以蛋白含量(μg)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。

6. 样品测定:将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度,取50μl 样品,加入500μl 2x Bradford 染色液和450μl 的去离子水,混匀后放置5-10 分钟,然后以A 号比色皿为对照,测定样品吸收值A595。

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