总糖的测定
一、实验原理
样品经处理去除蛋白质等杂质后,加入盐酸,在加热条件下使蔗糖水解为还原性单糖以直接滴定法测定水解后样品中的还原糖总量。 二、试剂 6mol/L HCL、20% NaOH、甲基红指示剂(称取0.1g甲基红,用60%乙醇溶液溶解定容至100ml。)、碱性酒石酸铜甲液(称取15g硫酸铜及0.05g次甲基蓝,溶于水中并稀释至1000ml)、碱性酒石酸铜乙液(称取50g酒石酸钾钠及75gNaOH,溶于水中再加4g亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至1000ml,储存与橡皮塞玻璃瓶中。)、0.1%葡萄糖标液(精密称取1.000g经过99℃±1℃干燥至恒重的分析纯葡萄糖,加水溶解后移入1000ml容量瓶中,加入5mlHCL,用水稀释至1000ml。) 三、实验步骤
1、标定碱性酒石酸溶液 ⒈预测
准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml与锥形瓶中,加水10ml和玻璃珠两粒,从滴定管滴加约9ml葡萄糖标液,加热使其在两分钟内沸腾,维持沸腾两分钟,趁沸腾以以先快后慢的速度滴加样品溶液,测定时始终保持沸腾,待溶液蓝色变浅,以0.5滴/min的速度继续滴加葡萄糖标液,直至溶液蓝色退去为终点。 ⒉精密滴定
准去吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml与锥形瓶中,加水10ml和玻璃珠两粒,从滴定管滴加葡萄糖标液,其用量比预测定少约0.5~1ml,加热使其在两分钟内沸腾,维持沸腾两分钟,趁沸腾逐滴加入葡萄糖标液,直至溶液蓝色退去为终点。 2、测定果珍中总糖 ⒈样品预处理
吸取饮料5ml,后转入250ml容量瓶,向其中加入5ml6mol/LHCL,放入70℃水浴中水解15min,取出用20%的NaOH调节PH至中性,用甲基红做指示剂(颜色由红至黄),定容备用,测定时根据浓度做适当稀释。 ⒉测定 ① 预测
准去吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml与锥形瓶中,加水10ml和玻璃珠两粒,从滴定管滴加约5ml上述转化液,加热使其在两分钟内沸腾,,维持沸腾两分钟,趁沸腾以以先快后慢的速度滴加样品溶液,测定时始终保持沸腾,待溶液蓝色变浅,以0.5滴/min的速度继续滴加转化液,直至溶液蓝色退去为终点。 ② 精密测定
准去吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml与锥形瓶中,加水10ml和玻璃珠两粒,从滴定管滴加转化液,其用量比预测定少约0.5~1ml,加热使其在两分钟内沸腾,维持沸腾两分钟,趁沸腾逐滴加入转化液,直至溶液蓝色退去为终点。 四、实验记录及数据处理 1、碱性酒石酸铜的标定 葡糖糖标液浓度:1mg/ml平行组葡糖糖标液消耗体积V1/ml预测定12.11112.21212.17312.19 2、样品测定(m样品=10.3485g)在从上述处理液中取25ml定溶到100ml进行实验。 平行组消耗试样体积V/ml预测定11.74111.34211.37311.39 3、数据处理
式中:F——10ml酒石酸铜(甲液乙液各5ml)相当于还原糖的质量,mg; c——葡糖糖标液浓度,mg/ml;
V1——滴定时消耗葡糖糖标液的平均体积,ml。
式中:V——转化液消耗体积的平均值
F——10ml酒石酸铜(甲液乙液各5ml)相当于还原糖的质量,mg; ——样品稀释后的总体,ml; m——样品的质量,g; 五、结论
经测定,该七喜饮料中还原糖含量为10.35%。
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