基因工程技术 高考复习知识点集锦

下图是某质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示酶切后目的基因插入位点。下列有关叙述正确的是

A． 基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因

B．将重组质粒1、2、4导入大肠杆菌，大肠杆菌都能在含氨苄青霉素培养基上生长 C．若要确定目的基因是否表达，应首选重组质粒2导入受体细胞 D．将重组质粒4导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列 现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、 G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：

(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由___________连接。

(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是___________末端，其产物长度为____________。 (3)若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应 DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有___________种不同DNA片段。

(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是____________。 导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加__________的培养基进行培养。经检测，部分 有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是____________。

如图1所示，已知质粒pZHZ1的大小为3.7kb（1kb=1000对碱基），限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb，限制酶E切割位点距限制酶F切割位点0.2kb，限制酶F切割位点距限制酶H切割位点0.5kb．现用限制酶E和F（两种酶识别切割序列完全不同）从某DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1上相应的E-F区域，请回答下列问题：

（1）所形成的重组质粒pZHZ2______（能或不能）被限制酶E或F切开．

（2）若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，酶切结果如图2所示．则目的基因的大小为______kb，目的基因内部的限制酶G和H切割位点分别位于图2中的位置______ 和______上（要求填0～11中的某个数字）． （3）若想获得转上述目的基因的山羊，则需将重组质粒pZHZ2通过______法导入至山羊的______（细胞）中，经胚胎早期培养后，再进行______（技术），使其发育成为转基因山羊．

（4）若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是______．

chlL基因是蓝藻拟核DNA上控制叶绿素合成的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失chlL基因的变异株细胞。技术路线如下图所示，对此描述不正确的是

A．chlL基因的基本组成单位是脱氧核苷酸

B．①、②过程一定要使用同一种限制酶 C．①、②过程都要使用DNA连接酶

D．若操作成功，可用含红霉素培养基筛选出该变异株

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