荧光法测定饮料中维生素C的含量(4)

反应时间 0min 5min 10min 15min 20min 25min 1组F值 2组F值 3组F值 平均值 117.9 118.3 117.2 117.8 74.31 75.22 74.83 74.78 65.22 65.15 65.73 65.37 59.67 59.43 59.16 59.42 58.95 59.01 58.97 58.98 58.78 58.89 58.86 58.84 本文实验表明，作为掩蔽剂的硼酸—醋酸钠溶液加入空白管溶液后的时间对荧光强度值有影响。从表1可知，硼酸—醋酸钠溶液加入空白管后，必须放置15min后，荧光强度值才能够降低到最低值，否则空白值会偏高，对实验数据测定带来影响。

3.1.2 醋酸钠的影响

表2 加入醋酸钠溶液后反应时间对荧光强度的影响 反应时间 0min 3min 2371 2385 2387 2381 6min 2342 2347 2351 2346 10min 2301 2298 2304 2301 15min 2289 2277 2284 2283 1组F值 2394 2组F值 3组F值 平均值 2405 2415 2404 本文实验了当维生素C标准溶液2.0ml（维生素C加入量为60ug）时，醋酸钠溶液加入后，加入邻苯二胺溶液的不同时间对荧光强度值的影响。从表2可知，醋酸钠溶液在加入后存在于溶液中时间越长，荧光强度值就越低，从而降低了方法的灵敏度。因此，当标准溶液或者样品溶液中加入醋酸钠溶液后，摇匀，立即在暗处加入邻苯二胺溶液，可以提高方法的灵敏度，减少实验的误差。

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3.2 标准曲线的测定结果与分析

表3 标准曲线 V/ml（标准液） 0.5 0.8 1 1.3 1.5 1.8 2

根据表3，可绘图3：

F0值（空白值） 59.43 59.43 59.43 59.43 59.43 59.43 59.43 F值 646.8 1004 1219 1601 1884 2198 2415 ΔF值（相对值） 587.37 944.57 1159.57 1541.57 1824.57 2138.57 2355.57 -- 17 --

图2标准曲线

实验所得标准曲线表明，维生素C含量在15~60ug/14ml范围内有良好的线

标准曲线2500荧光强度值y = 39.798x-10.621R^2 = 0.9988荧光值线性 (荧光值)2000150010005000010203040浓度 (ug/14ml)506070性关系，其工作曲线的回归方程为： y=39.798x－10.621,相关系数R=0.9993

由于本法中维生素C含量在15~60ug/14ml范围内有良好的线性关系，故本文采用直接定点比较法来计算样品中维生素C总量[23]。 式中：X

?F1?F2??C?VX??100?F3?F4??V1——样品中抗坏血

酸含量，mg/100ml

F1——样品溶液的荧光强度 F2——样品空白的荧光强度 F3——标准溶液的荧光强度 F4——标准空白的荧光强度

C——抗坏血酸标准溶液浓度，mg/ml V——样品混合液总体积，ml V1——吸取样品的体积，ml

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3.3 样品的测定

3.3.1 样品重现性的测定结果与分析

表4 统一鲜橙多重现性测定

试样 （样品一） 1 2 3 4 5 6 7 8 VC平均值 S（标准偏差） V%（变异系数）

表5 统一蜜桃多重现性测定

试样 （样品二） 1 2 3 4 5 6 7 8 VC平均值

F2 F1 ΔF VC含量（mg/100ml) 39.28 39.41 39.85 39.44 39.53 39.66 39.51 39.59 20.82 0.091 0.43% 2381 2382 2376 2368 2386 2359 2385 2367 2341.72 2342.59 2336.15 2328.56 2346.47 2319.34 2345.49 2327.41 20.88 20.88 20.83 20.75 20.92 20.67 20.91 20.75 F2 F1 ΔF VC含量（mg/100ml) 31.78 32.37 32.55 31.37 32.51 31.71 31.28 32.19 13.83 -- 19 --

1585 1578 1597 1582 1595 1589 1569 1574 1553.22 1545.63 1564.45 1550.63 1562.49 1557.29 1537.72 1541.81 13.84 13.78 13.95 13.82 13.92 13.88 13.71 13.74

S（标准偏差） V%（变异系数）

0.085 0.61% 表6 达能脉动重现性测定 试样 （样品三） 1 2 3 4 5 6 7 8 VC平均值 S（标准偏差） V%（变异系数） 26.91 26.77 26.59 26.65 26.79 26.27 26.34 26.88 16.07 0.071 0.44% 1834 1829 1839 1821 1840 1826 1818 1832 1807.04 1802.23 1812.41 1794.35 1813.21 1799.73 1791.66 1805.12 F2 F1 ΔF VC含量（mg/100ml) 16.11 16.07 16.16 15.99 16.16 16.04 15.97 16.09 样品标识上维生素C含量分别为：25mg/100ml,15mg/100ml,20mg/100ml；实验所测得维生素C含量为：

20.82mg/100ml，13.83mg/100ml，16.06mg/100ml。实验所得数据略小于样品标识上含量，属于正常范围。

样品的重现性（精密度）可由变异系数（V）来表示，由表4，表5，表6的实验数据可知，所做的三种饮料的变异系数分别为0.43%，0.61%，0.44%，表明用此荧光光度法测定饮料中的维生素C含量的重现性是好的。

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