玉屏风汤剂不同配伍对黄芪甲苷含量的影响

作者：尹雪 黄月纯 张素中 魏刚 【摘要】 目的建立玉屏风汤剂中黄芪甲苷的含量测定方法，探讨不同配伍对玉屏风汤剂中黄芪甲苷含量的影响。方法采用高效液相色谱?蒸发光散射检测器（hplc-elsd）法测定。采用phenomen色谱柱；流动相为乙腈-水（32∶68）；流速1 ml/min；柱温35℃；elsd漂移温度103℃，载气（氮气）流量2.5 l/min。 结果黄芪单煎相比，不同配伍的合煎对黄芪甲苷的含量均呈现不同程度的下降趋势。结论玉屏风不同配伍汤剂中黄芪甲苷的含量在煎煮过程中存在动态变化，为玉屏风汤剂的配伍 规律 及物质基础的研究提供了一定的 参考 。 【关键词】 玉屏风汤剂 配伍 黄芪甲苷 高效液相色谱法 玉屏风源于元代《丹溪心法》，由黄芪、白术（炒）、防风3味药组成，功能益气固表，止汗，用于表虚不固，自汗恶风，面色白，或体虚易感风邪者。黄芪主要含异黄酮、皂苷、氨基酸及多糖类等有效成分；防风主要含色原酮、挥发油、氨基酸及多糖类等有效成分；白术主要含内酯类、挥发油及多糖类等有效成分。对玉屏风方中药味的主要成分含量与指纹图谱研究已有相关 文献 报道［1～4］，但玉屏风汤剂的化学成分研究报道较少。为探讨玉屏风汤剂的配伍规律及物质基础，本项目采用hplc指纹图谱与主成分含量测定相结合的方法进行研究。本文报道不同配伍对黄芪甲苷含量的影响。 1 仪器与试药 高效液相色谱仪（日本岛津lc?10a）；蒸发光散射检测器（elsd）；黄芪甲苷对照品，购自 中国 药品生物制品检定所；3批黄芪、防风、白术（炒）饮片，分别购于广东多家药材公司，黄芪为豆科蒙古黄芪astragalus membranaceus(fisch.)bge. var mongholicus(bge.)hsiao的根，防风为伞形科植物防风saposhnikovia divaricata(turcz.)schischk.的根，白术为伞形科植物白术atractylodes macrocephala koidz.的根的麸炒品；乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯。 2 方法与结果

2.1 色谱条件［5，6]色谱柱为phenomen（250 nm×4.6 nm，5 μm）；流动相为乙腈-水（32∶68）；流速1 ml/min；柱温35℃；elsd漂移温度103℃，载气（氮气）流量2.5 l/min。结果表明在此条件下此成分能达到较好的分离效果，理论板数以黄芪甲苷峰 计算 不低于4 000，缺黄芪阴性对照无干扰。结果见图1～3。 图1 黄芪甲苷对照品hplc图（略） 图2 玉屏风汤剂hplc图（略）

图3 缺黄芪甲阴性对照hplc图（略） 2.2 对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，用甲醇溶解配制成每毫升含0.5 mg的对照品溶液。 2.3 不同配伍汤剂的制备 按《中国药典》的处方配比〔黄芪18 g，防风6 g，白术（炒）6 g〕，取黄芪饮片45 g，防风饮片15 g，白术（炒）饮片15 g，加水500 ml，浸泡30 min，加热煮沸后文火慢煎40 min，取出，趁热用四层纱布滤过，药渣再加水300 ml加热煮沸后文火慢煎30 min，取出，趁热滤过，合并2次煎液，放冷，置500 ml量瓶中，加水至刻度，得全方汤剂。分别取黄芪、黄芪加白术、黄芪加防风等不同配伍药材饮片，同法制得各配伍汤剂。

2.4 供试品溶液的制备［5］ 精密吸取各配伍汤液50 ml，分别用水饱和正丁醇提取5次，30 ml/次，合并正丁醇液；用氨试液洗涤3次，20 ml/次，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解，并定容至5 ml，即得不同配伍汤剂供试品溶液。 2.5 线性关系考察 取黄芪甲苷对照品，精密称定，用甲醇溶解并配制成每毫升含1.01 mg的对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液1，2，5，10，20 μl，按上述色谱条件测定峰面积，以进样量（μg）的对数值为横坐标，以峰面积（a）的对数值为纵坐标，求得线性回归方程为y=5.000 6+1.564 1x，线性范围为1.01～20.2 μg，r=0.999 9。

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