舒筋活络胶囊抗类风湿性关节炎作用及机理研究(2)

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类风湿关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ），是以对称性、多

发性关节炎为主要表现的全身性疾病，我国的患病率为Ｏ．３％～Ｏ．４％。任何年龄均可发病，多见于３０～５０岁女性Ⅲ。发病年龄８０％在２０～４５岁，女性是男性的３倍。自１８００年ＲＡ被首次认定以来，全球平均有Ｏ．３～２．１％的人群罹患此病，所造成的活动功能障碍是非ＲＡ病人的６倍，其生命预期值与正常人群相比降低１５～２０年ｎ¨”。患ＲＡ因种族、地理环境不同而有异，据统计，在美国６５岁以上ＲＡ发生率高达１０％“１。该病早期由于关节的衬里和被覆的肌腱炎症造成关节肿胀、疼痛、活动困难，约有１０％～１５％患者病情进展迅速，在两年内出现关节软骨、骨破坏和畸形。约７０％患者的多关节炎呈反复、周期性发作，并逐渐加重，最终导致关节功能减退和丧失。ＲＡ是一种慢性、致残率很高的常见病。据美国统计，ＲＡ在所有丧失劳动能力疾病中，占第二位“１。

类风湿性关节炎属于祖国医学中的“痹证”范畴，其病因较复杂，

在《素问 痹论》中曾提出：“风寒湿三气杂至合而为痹”，后来又有医家从刁ｉ同侧面充实。中医药治疗ＲＡ有复方、单味药和外治等方法，取得了较好疗效。现代医学认为ＲＡ发病机制与感染、遗传、内分泌等因素有关，主要病理改变为关节滑膜及周围结缔组织异常增生，关节软骨进行性破坏为主的慢性自身免疫性疾病。以滑膜衬里层细胞增生，血管翳形成，单核细胞浸润，进而软骨侵蚀和关节破坏‘６１。西医以非甾体抗炎药及生物制剂应用最多，但因长期大剂量应用此类药物，其不良反应较为严重，并且大部分生物制剂需要高度纯化的蛋白质，不仅价格昂贵，而且口服活性差，在体内又很快被消除。

舒筋活络胶囊具有祛风除湿、舒筋活络、消炎止痛等功效，主治

风寒湿痹、筋骨疼痛，类风湿性关节炎等症。本课题运用现代药理学研究手段，观察舒筋活络胶囊抗炎、镇痛作用及对免疫功能的影响，并对其抗ＲＡ药理作用及机理进行了探讨，为其临床应用提供药理学依据。

实验研究

１、实验材料

１．１实验药品与试剂

舒筋活络胶囊处方由五加皮、威灵仙、羌活等中药组成，由四川

省中药研究所中试中心提供，批号：０３ｌ００９。实验前用蒸馏水稀释成大鼠给药浓度为３３．２％、１６．６％、８．３％（ｇ生药／１００ｍ１），灌胃（ｉｇ）体积为１ｍ１／１００９体重。小鼠给药浓度为１６．６％、８．３％、４．１５％（ｇ生药／ｌＯＯｍｌ），灌胃（ｉｇ）体积为Ｏ．２ｍｌ／１０９体重。实验分高、中、低剂量，分别相当于临床成人（６０ｋｇ）日用量的２０、１０、５倍。

正清风痛灵：西安利君制药股份有限公司，批号：０３１０３７９；

地塞米松磷酸钠注射液：湖北天药药业股份有限公司，批号：

２００３０８１３：

盐酸吗啡注射液：沈阳第一制药厂，批号：９５０３０ｌ；

硫酸庆大霉素注射液：８万单位／２ｍ１，批号：０２０４１３１，石家庄

制药集团公司；

注射用环磷酰胺：上海华联制药有限公司，批号：０３０８０１；

卡介苗佐剂：北京生物制品研究所，批号：２００４０１１４，６０ｍｇ／支：

不完全佐剂：１ｍｇ／ｍ１ｓｉｇｍａ公司，与卡介苗佐剂配制成１０ｍｇ／ｍｌ；

ｊ

角叉菜胶：（ｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ）ＳｉｇＩＩｌａ公司，以生理盐水配制成浓度

为１％的溶液；

伊文思兰：（Ｅｖａｎｓｂｌｕｅ）上海化学试剂采购供应站，进口分装，

９７０４０ｌ：

２，４一二硝基氯苯：上海试剂一厂，８９０９０１：

ＮＯ试剂盒（硝酸还原酶法）：南京建成生物工程研究所，０３０８２２；ＴＮＦＲＩＡＫｉｔ：解放军总医院科技开发中心放免所；

ＰＧＥ。ＲＩＡＫｉｔ：解放军总医院科技开发中心放免所：

Ｂｃ卜２试剂：一抗：ｂｃ卜２（ｃ一２）ｍｏｕｓｅｍ。ｎｏｃｌｏｎａｌＩｇＧｌｓａｎｔａ

ｃｒｕｚ公司；二抗及相应试剂盒：北京中杉金桥生物技术有限公司；

ｆａｓ试剂：一抗：ｆａｓ（Ａ一２０）ｒａｂｂｉｔｐｏｌｙｃｌｏｎａｌＩｇＧｓａｎｔａｃｒｕｚ

公司；二抗及相应试剂盒：北京中杉金桥生物技术有限公司：

１．２实验动物：

小鼠：昆明种，雌雄兼用，体重２０±２９，由成都中医药大学实

验动物中心提供，动物合格证号：Ｊ｜『实动管第１１号。

大鼠：ＳＤ，全雄，体重１５０一１８０９，由成都中医药大学实验动物

中心提供，动物合格证号：川实动管第１１号。

１．３主要仪器：

热板测痛仪：ＧＪ一８４０２型，浙江宁海县白石电子医药仪器厂：

电子天平：沈阳龙腾电子称量仪器有限公司，型号：ＬＤ６００一１，

精度：０．１９；

电子天平：ｓａｒｔｏｒｉｏｕｓ，ＢＰ６１，精度：０．１ｍｇ；

分光光度计：上海棱光技术有限公司，ｓｅｐｅｃｔｒｕｍｌａｂ，２２ｐｃ；

ＸＨ一６０ｌＯＡ型Ｙ计数仪：西安国营二六二厂；

ＦＪ一２ｌＯＴＰ型液体闪烁计数器：西安国营二六二厂：

奥林巴斯Ｂｘ一５０光学显微镜：日本；

Ｍｉａｓ一２０００图形分析系统：四川大学图像图形研究所。

１．４统计方法：

使用ｓｐｓｓｌＯ．０统计软件包处理实验数据。正态分布数据两两比较采用成组ｔ检验，多组比较采用方差分析。

２、方法与结果

２．１抗炎实验‘７１‘８’

２．１．１对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响

取健康雄性小鼠５０只，按体重随机分为５组。第一组灌胃蒸馏

水作为空白对照组；第二至四组分别灌胃舒筋活络胶囊高、中、低浓度的药液，作为给药组；第五组腹腔注射Ｏ．００５９／ｋｇ地塞米松作为阳性对照组。每天给药１次，连续３天。末次给药３０ｍｉｎ后，将２０ｕ１二甲苯涂于小鼠左耳廓两面致炎，右耳不涂为对照，致炎１ｈ后处死动物，用直径８１１１Ｉｎ的打孔器在两耳对称位置取下左右耳片称重，耳廓肿胀度（ｍｇ）＝左耳片重量一右耳片重量。结果见表ｌ。

表ｌ舒筋活络胶囊对小鼠耳廓肿胀度的影响（Ｘ±ｓＤ）

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