三 鉴别方法及质量控制
3.1鉴别方法 取本品粉末0.2g。甲醇5ml,放置12小时,滤过,取滤液作为供试品溶液。另取绿原酸对照品,加甲醇制成1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验,吸取供试品溶液10?20 ul、对照品溶液ul。分别点于同一硅胶H薄层板上,以乙酸丁酯-甲酸-水(7:2.5:2.5)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,在紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点[3]。结果见图1。
3.2 质量控制 金银花的抗菌有效成分以绿原酸和异绿原酸为主,药典规定绿原酸的含量不得少于1.5%。但金银花药材中绿原酸含量极不稳定,易受多种内外因素的影响而发生变化。据郑欣荣报道主要有以下3个方面。
3.2.1生物、生态因素的影响 ①植物体内各器官在不同的发育阶段,其化学成分含量也不同。②在不同时期采收到的花蕾中总绿原酸含量可相差50%。因此,药材合理采收,对提高药材产量和保证质量稳定具有重要意义。③生存环境对忍冬体内绿原酸动态积累同样有着重要影响。生长在阳坡的忍冬叶、花蕾、茎和叶花混品中的绿原酸含
量均高于阴坡的同类样品。而不同产地的金银花由于生长环境的生态条件不同,其绿原酸的含量也不同。不同物种来源的金银花中绿原酸含量的差异则更加显著,含量最高和最低的物种间差异达十几倍。 3.2.2提取方法的影响 用传统工艺法如煮法、乙醇回流法、渗漉法等对金花中绿原酸进行 提取,绿原酸得率都较低。而经纤维素酶提取工艺处理后,能显著提高金银花提取物得率和绿原酸得率。 3.2.3加工炮制方法的影响 不同加工炮制方法可直接影响金银花中绿原酸等成分的含量。如蒸晒品绿原酸和异绿原酸含量比生晒品高,而黄酮和挥发油含量低于生晒品,阴干法含绿原酸最高,硫磺熏晒法次之,晒干法含量最低。烘制品与生品相比,钙、铁、镁离子煎出量增高,锌、钠离子煎出量降低;绿原酸、总糖、可溶性糖含量均随温度的增高和 时间的延长而降低;炭品中绿原酸含量仅为生品的1/10,鞣质含量为生品的1/2[4]。
四 化学成分
金银花中的化学成分大致可分为挥发油类、黄酮类、有机酸类、醇类和微量元素等。
4.1挥发油类 金银花中目前鉴定出的挥发油化学成分多达近70种,包含芳樟醇、双花醇、棕榈酸、二氢香苇醇、二十四碳酸甲酯、十八酸乙酯和棕榈酸乙酯等多种化合物。因产地、样品的不同,化学成分存在一些差异,主要化学成分有芳樟醇。金银花干花挥发油化学成分则以棕榈酸为主。
4.2黄酮类 1949年冲七太郎首先从金银花中分离出木犀草素,1961
年他又分离出忍冬苷。金银花中还含有木犀草素7-0-ɑ-D-葡萄糖苷、木犀草素7-O-β-D-半乳糖背、彬皮素-3-O-β-D葡萄糖昔、金丝桃苷、corymbosin和5 -羟基3 ’4’7’ 三甲基黄酮。
4.3有机酸 类绿原酸类化合物是金银花的主要有效成分,包括绿原酸、异绿原酸和咖啡酸。其中异绿原酸为混合物,其异构体有7种,分别为4,5 -二咖啡 酸酞奎尼酸、3,4 - 二咖啡酸酞奎尼酸、3,5 -二二咖啡 酸酞奎尼酸、1,3 -二咖啡酸酞奎尼酜、3 -阿魏酞奎尼酸、4 -阿魏酞奎尼酸和5 -阿魏酞奎尼酸。另外,黄丽瑛等从金银花氯仿萃取物分离得到棕榈酸和肉豆蔻酸,毕跃峰等首次从金银花中分离得到原儿茶 酸、阿魏酸、2(E)-3-乙氧基丙烯酸。
4.4 其他 毕跃峰等从金银花中分离出了三十五醇、二十五醇、2-〈2 -丙烯氧基〉-乙醛,而金银花中还含有Fe、Mn、Cu、Zn、Ti、Sr、Mo、Ba、Cr、Pb、V、Co、Li和Ni等10多种微量元累。
目前许多关于金银花的报道都以灰毡毛忍冬作为研究材料。2010版《中国药典》将灰毡毛忍冬收入为山银花,这就意味着许多原本作为金银花化学成分的物质需要重新被认定 [5] 。
五 临床用途
金银花药载于《名医别录》,宋、元以后多用于临床,主治外科疮疡诸症,至清代随温病学派的发展,金银花广为应用,多种重要温病方剂均以本品为主药,此外,用于热毒血痢,疫喉肿痛,脱骨疽等多种疾病,于今则在现代药理学研究的基础上发展了许多用途。 5.1急性感染性疾病 金银花以其清热解毒之功、广泛用于多种急
性感染性疾病,如感冒、流感、急性上呼吸道感染、肺炎、急性菌痢、沟端螺旋体病,急性皮肤感染等。常用剂量12-18g,热毒甚者可达30g或更多。常用制剂、方剂有银翘散,用于温热病初起;清营汤治咽喉肿痛;银楂芩连汤等治热血痢;无味消毒饮治疗热毒痈疮等;常用现代制剂有银黄注射液,双黄连注射液等。
5.2在防治SARS中的应用 由于金银花具有广谱的抗菌抗病毒和清热解毒、凉散风热的作用,所以在防治SARS的工作中,金银花占了主导地位。国家中医管理局推荐的防治“SARS”的中医处方中有一半以上的方药中,都有金银花,所以表明对本病的防治具举足轻重的作用。如用“金银花20 g,连翘15 g,板蓝根20 g,川藿香10 g,防风10 g,贯众15 g,甘草3 g。1剂/d,连服7 d,可预防SARS病的流行。又如:金银花20 g,板蓝根20 g,大青叶20g,贯众20 g,野菊花20 g,甘草20 g。1剂/d。连服7 d为1疗程,也可用于对SARS病毒的预防和治疗。
5.3 对五官科和皮肤病感染型疾病及其炎症也有很好的效果,对妇产科、肛肠疾病等也有一定效果,特别是对各科的多种热毒、痈肿、疔疮,金银花都具有一定的治疗作用[6]。
六 药理作用
金银花具有抗病原微生物、消炎、解热、保肝、抗生育、止血、免疫调节、降血脂、中枢兴奋等作用。
6.1抗病原微生物 金银花对多种致病菌均有一定的抑制作用。体外试验表明:金银花对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆菌、
痢疾杆菌、霍乱弧菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌等均有一定的抑制作用,对肺炎杆菌、脑膜炎双球菌、绿脓杆菌、结核杆菌亦有效。
金银花对流感病毒、孤儿病毒、疱疹病毒、猴免 疫缺陷病毒(SIV)等多种病毒均有抑制作用,金银花注射液对绿脓杆菌内毒素有一定的对抗作用。对伤寒杆菌内毒素有减毒作用。此外,试管试验表明,金银花及其藤煎剂对钩端螺旋体有抑制作用。
6.2消炎及解热作用 金银花提取物对角叉菜、蛋清等引起的大鼠足跖肿胀有抑制作用,还有明显的抗渗出和增生作用。对金银花解热、消炎、免疫等实验研究结果表明其水煮液,口服液和注射液对角叉菜胶、三联菌 苗致热有不同程度的退热作用,对蛋清、交叉菜胶、 二甲苯所致水肿有不同程度的抑制作用,另外,还能明显提高鼠腹腔巨噬细胞吞噬巨红细胞的吞噬百分率和吞噬指数,从而证明临床作用为清热解毒治疗感染性疾病主要是通过调节机体免疫功能而实现的。 6.3保肝利胆作用 动物实验表明,金银花中的三萜皂苷对CCL4引起的小鼠肝损伤有明显的保护作用,并明显减轻肝脏病理损伤的严重程度。金银花所含绿原酸能增进大鼠胆汁分泌,黄褐毛忍冬总皂甙皮下注射能显著对抗四氯化碳,扑热息痛及D-半乳糖胺所致 肝中毒小鼠血清谷丙转氨酶升高,降低肝脏甘油三 酯含量,明显减轻肝脏病理损伤程度。
6.4其它作用 金银花有较好的抗早孕作用,腹腔注射金银花提取物有终止小鼠早、中、晚期妊娠作用。金银花有提高免疫功能的作用,煎剂能增加白细胞、炎性细胞的吞噬能力。有研究表明,金银花及酒
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