影响加压蒸汽灭菌效果的因素

影响加压蒸汽灭菌效果的因素

1 被灭菌物体含菌量

含菌量越高，需要的杀菌时间越长。因此，用天然原料配制的培养基所需的灭菌时间要比组合培养基所需的长。 2 灭菌锅内空气排出程度

灭菌锅是靠蒸汽的温度而不是单纯靠压力来达到灭菌效果。混有空气的蒸汽与纯蒸汽相比，其压力与温度的关系很不相同（见表1），因此，使用加压蒸汽灭菌时，必须先彻底排尽锅内的蒸汽。检验锅内蒸汽是否排尽的方法有：1 灭菌锅上同时装有压力表和温度计2 将待检测气体引入深层冷水中，若只听到“扑扑”声而无气泡冒出，则证明蒸汽中已不含空气3 灭菌锅内加入耐热性的芽孢杆菌，灭菌后取出培养，视其是否能生长既可知灭菌温度是否达到4 加入适当熔点的固体试剂，经灭菌后看其是否融化，例如可加入硫磺、乙酰替苯胺或琥珀酸结晶，等等。不过，3、4两法因不能及时知道灭菌温度，故很少采用。 压力读数 Kg/cm2 0.35 0.7 1.05 1.4 1.75 2.1 磅/英寸2 5 10 15 20 25 30 锅内温度 纯蒸汽 109 115 121 126 130 134 排出1/2空气 94 105 112 118 124 128 不排除空气 72 90 100 109 115 121 3 灭菌对象的PH 灭菌对象的PH﹤6.0时微生物易死亡，PH在6-8时不易死亡 4 灭菌对象的体积

灭菌对象的体积大小因影响热传导速率和热容量，顾会明显影响灭菌效果。在实验室工作中，在对大容量培养基灭菌时，必须注意相应延长灭菌时间。 5 加热与散热温度

在加压灭菌时，一般只注意达到预定压力后维持时间。事实上，由于季节的变化，或灭菌物体体积的大小，都会使“上磅”或“下磅”时间出现很大的差别，从而影响培养基成分的破坏程度，进一步还会影响研究工作的准确性和重演性，故应适当控制。

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