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医学研究中安全防护与相关法规

分枝杆菌）

感染病的传染源包括感染病患者、某些患病动物和病原体携带者。病原体感染人体后，当机体免疫与病原体出于平衡状态时，不发病，但机体出现特定的免疫反应并可向体外不断地排除病原体，称作亚临床感染，此种传染源称作健康携带者或健康带菌者。食品、牛奶行业、托幼机构、医务工作等威胁性行业从业人员，按规定应定期体检，如未及时发现携带者并调换工作，则可称为重要的传染源，伤寒玛丽（从胆汁中大量排菌的伤寒慢性带菌者）的著名范例。

（六）医院感染的预防措施：各级医院均应设立医院感染控制委员会（ICC）或医院感染控制小组（ICT），承担指导与评价，监测医院感染率，感染来源及耐药微生物株变迁以及调整或改进预防措施的职责，认真贯彻“清洁，消毒和隔离”原则，在普遍性预防措施基础上，雅阁执行国内外附加的标准预防措施。 标准预防措施的主要内容：

1、培训医务人员和监测其健康状况与携带病原微生物状况，并及时调整工作岗位；

2、正规施行内镜、插管、留置导管、腹膜透析等创伤性诊断中的无菌操作，对于患者血液等各种体液、粪便、痰及其他分泌物标本的检查与处理，均应严格遵守消毒隔离规程，凡是手部有伤口或渗出液者，严禁从事接触患者标本或者为患者施行创伤操作，凡是需销毁的标本和一次性医疗用品，严禁回收利用；

3、正确使用灭菌和消毒措施，尽量应用热力和射线等可靠地物理灭菌法，纠正使用有局限性的化学消毒剂和紫外线消毒的误区，特别注意消毒剂有效的使用浓度和作用时间。最好是碱性戊二醛，甲醛，酒精也行。射线灭菌也可以。不要用新洁尔灭，对病毒无效，刺激非常大。没有办法才使用使用有局限性的化学消毒剂和紫外线消毒，比如紫外线消毒一本书，紫外线没有穿透性，只能消毒一个封面。 4、严禁不考虑适应症，滥用抗生素

第一章 第三节

实验室感染：指实验室工作人员及有据可查的非实验室工作人员被实验室内的病原微生物或者医学寄生虫感染或发病，统称为实验室感染。 最早1849年就报道实验室感染

国内外实验室感染最常见的10种病原体（1979-99）：结核分枝杆菌、立克次氏体（Q热）、汉坦病毒（出血热）、虫媒病毒、乙型肝炎病毒（HBV）、布鲁氏菌，沙门氏菌，志贺氏菌，非甲非乙型肝炎病毒，隐孢子菌。

不同年代实验室感染病原体构成的变迁：1978年之前主要是细菌，其次是病毒，1978-1999年病毒上升至将近一半，细菌下降至28%

实验室细菌性感染以布鲁氏菌感染最常见

案例：HIV、SARS、最严重的是2004年3-4月北京中国疾病预防控制中心（CDC）某研究所从事SARS研究的BLS-3实验室发生SARS冠状病毒。由于研究所肠道病毒形态学研究室越轨研究，采用未经验证的细胞裂解法灭火病毒。

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3、简述发生实验室感染的原因和预防措施。 实验室感染途径与追根溯源：

1、 实验室内病原体可通过呼吸道、消化道及皮肤粘膜、或通过直接接种如针头，刀剪等利器刺伤，或媒介昆虫叮咬及实验动物咬伤等进入人体内。 2、 多种实验室操作可使病原体形成气溶胶，引起呼吸道传播，易新成气溶胶的操作主要是细菌接种，标本涂片，匀浆振荡，混合标本，立新操作开启安普及注射，使用移液管及倾倒液体标本等。

3、 一些不良卫生习惯和操作，如在实验室内进食饮水，吸烟，用嘴吸移液管及意外被液体标本溅入口腔和眼睛结膜内等，可引起消化道传播。

实验室最常见的直接暴露原因：实验中工作的接触、气溶胶、意外事故，前三种是最重要的，各占25%，还有饲养动物（13%），临床标本，处理废弃玻璃器皿，尸体解剖，以及未确定的原因，即找不出原因

导致实验室感染的意外事故类别：1带血针头刺伤，2液体标本泼洒，3玻璃容器破碎误伤，4用口吸移液管，内容物误吸入口，5被实验室动物咬伤，6离心管破裂，内容物漏出，7原因未明。实验室感染是防不能防的，不能完全避免，只能尽量减少发生

1990年以来世界15个实验室发生的66例布鲁氏菌感染的实验室感染事故，其原因多为违章操作，包括：

1实验室操作时未采取有效的防护措施； 2离心管破裂，内容物污染地面； 3用鼻子闻培养细菌的培养基气味；（臭鸡蛋味，厌氧，没有臭鸡蛋味，需氧或半需氧） 4原因未明，虽然已经采取了所有防护措施，但仍然发生布鲁氏菌的实验室感染。

预防实验室感染的安全防护

1、 提高实验室工作人员对实验室生物医学安全防护的认知水平和重视程度（其重要性之权重约占70%）

2、 对实验室严格管理，认真执行规章制度，杜绝有章不循形同虚设，尤其要严格遵守对微生物的分类管理

3、 必要的安全防护设施（其重要性之权重约占30%） A、 生物安全柜（Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ级），高压蒸汽灭菌器等设备；生物安全实验室设施，biosafety level（BSL-1-4级，4级最高，我国最高为3级，目前还没有4级实验室）。

B、 乳胶手套、口罩、密封塑料离心管、专用污物袋等耗材，防护面具、移液管助吸气、垃圾储运桶等器材。

第一章 第四课

SARS疫情的由来

SARS严重急性呼吸综合症

典型性肺炎（大叶肺炎-肺炎链球菌，发生在肺实质）与非典型性肺炎（发生在肺间质） 非典型性肺炎的病因：

（1） 肺炎衣原体，即TWAR衣原体：1965年台湾小学TW-183株，1983年美国大学生acute respiratory-39株 （2） 肺炎支原体 （3） 嗜肺军团菌

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（4） 病毒：a、呼吸道合胞病毒（RSV），属于副黏病毒科肺炎病毒属，主要引起6个月龄一下婴幼儿细支气管炎及非典型性肺炎，可致儿童和成人普通感冒及上呼吸道感染。 b、冠状病毒，主要致普通感冒及气管炎，尚可致儿童和老年人肺炎。 c、SARS-CoV（新型冠状病毒）

2003年2月27日据美国疾病防止中心（CDC）官员说，对感染非典型性肺炎的人士进行检查结果发现，他们身体组织里有一种称为“冠状病毒”的微生物

新型冠状病毒(SARS-CoV)生物学性状：冠状病毒属，呈球形体，基因组为ssRNA，约含27-29kb，它与已知冠状病毒核苷酸同源性仅60%左右，属于第Ⅳ血清型或变异型

图4-2 非典型肺炎死亡病人脏器标本电镜观察见到的衣原体样颗粒

SARS属于非典型性肺炎中一种，是其中病死率高的非典型肺炎。非典型肺炎包括SARS。

4、你作为医务工作者或者医学 研究人员，请从2003年SARS突发疫情中，总结应汲取的经验与教训

(二) 从SARS流行疫情中应汲取的经验与教训

经验 1.科学地制定SARS防治规划，有的放矢着力于严格隔离传染源和消毒灭菌措施（切断传播途径）措施。

2、发现存在诊断不规范，SARS误诊率高（达1/3），在疫情中，后期北京市建立了SARS诊断网络实验室，发挥重要作用

3、从中央到地方，各级政党领导空前重视突发公共卫生事件的防治与控制工作，作为首要大事来抓，不惜人力和物力，体现了社会主义制度的优越性，2006年1月8日，国务院发布了《我国突发公共卫生事件的管理规定》充分体现生命之可贵和国家稳定与发展之需要。 教训：1、医院感染和临床实验室感染非常严重 有关部门疏于传染病管理的教育与培训，在医院硬件设施上未考虑隔离与防护功能，医务人员对隔离、消毒和防护观念淡漠。

2、对SARS患者的误诊漏诊非常严重

由于未及时建立SARS诊断网络实验室体系，有关单位缺乏通力协作精神，导致SARS误诊率高达1/3以上，有能力开展SARS病因学研究机构得不到研究标本，致使SARS疫情不断扩大，难以控制。

3、SARS病毒实验室病毒泄漏事故，后果非常严重 4、病因学研究中急功近利，误导防疫策略和措施

CDC某研究所SARS的衣原体病因假说诞生。不符合病因推论4原则：1从患者体内分离出病原体和纯培养2在其他病患者体内未发现此病原体，3可经动物实验复制出此病，4实验所复制的该病患动物体内，又从新分离出此病原体。凡是能分理处病原体的，应该遵循这四个原则。

5、对SARS 患者治疗抢救措施的失误

应辨证施治，个性化治疗，不应全国一律长期使用超大剂量激素。在SARS患者恢复期，已出现严重的后遗症和毒副作用。如骨质疏松等

6、瞒报疫情，贻害非常严重

7、从正反两方面分析行政领导的作为与主导作用：疫病初期反应迟钝，导致了蔓延；在事情公开之后，不是所有的措施都是合理且恰到好处的，比如，室外消毒，其实是不需要消毒的（通过室外的阳光和温度就可以杀死病毒），造成了不必要的经济损失，环境污染，以及人心惶惶。

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SARS患者使用糖皮质激素的适应证： a、有严重的中毒症状，高热3日不退

b、呼吸苦难，呼吸>30次/分，48小时内肺部X线阴影进展>50% c、肺部X线阴影表明多个肺叶病变且范围大于1/3 d、出现低氧血症

e、出现急性肺损伤或急性呼吸窘迫综合症 f、出现休克或多器官功能不全综合症 g、伴有严重基础病 h、合并有其他感染 i、年龄大于50岁

SARS患者使用糖皮质激素的剂量和疗程：甲波尼龙3mg/Kg/d*5d，病情笃重2，可给与冲击疗法，1000mg/d

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第二次课：生物安全实验室的设施与个体防护（教师：王玲、李杰）

第二章 第一节

生物安全实验室与生物安全柜

1、实验室生物安全防护水平（BSL）分几级？每级所能操作的微生物类别？ 2、生物安全柜的分级、分型、及送排风特点？ 3、生物安全柜柜内操作主要注意的事项？

生物安全实验室：就是指在含有致病的微生物及其毒素的实验室，为了保护实验样品、保护实验室人员安全、保护环境不被污染，通过实验室的设计建造，使用个体防护装置，遵从标准化操作规程等措施，以达到上述目的的实验室即为生物安全实验室。

建立生物安全实验室的意义：1、是建立病原微生物研究安全平台的需要；2生物国防、反恐的需要；3、是预防与控制传染病的需要；4、是动物防疫的需要；5、是出入境检验检疫的需要；6、是控制院内感染的需要；7、是参与GOARN（Global Outbreak Alert and response network）监测网络的需要。

建立生物安全实验室的基本原则：1、科学合理的原则；2、安全首位的原则；3、软件在先的原则；4、管理严格的原则；5、远离病原的原则；6、预防为主的原则；7、使用方便的原则；8、厉行节约的原则

1、实验室生物安全防护水平（BSL）分几级？每级所能操作的微生物类别？ 实验室生物安全防护水平（BSL）： 一级生物安全防护水平（BSL-1）：不致病的微生物，如教学实验室（基础实验室） 二级生物安全防护水平（BSL-2）：三类致病微生物，未知病人标本，肝炎研究室（基础实验室）

三级生物安全防护水平（BSL-3）：二类以上病原微生物，（生物安全防护实验室） 四级生物安全防护水平（BSL-4）：一类病原微生物，经呼吸道传播的烈性传染病。（高度生物防护实验室）

以前：中国分级P1-P4。欧洲的国家称为：S1、S2、S3、S4

病原微生物的分类： 一类：传染性强对人危害大的烈性传染病的微生物菌种，感染后引发的症状严重并危及生命，缺乏有效的预防措施的烈性传染病菌株，鼠疫耶尔森菌、01和0139群霍乱弧菌、炭疽杆菌、天花病毒、马堡病毒、埃波拉病毒

二类：感染后可引起较严重的症状，可危及生命，发病后不易治疗，对人群危害较大的微生物菌种，布氏杆菌、麻风杆菌、结核分枝杆菌、HIV、肝炎病毒、狂犬病毒、流行性出血热病毒、登革热病毒、斑疹伤寒立克次体、肉毒棱菌。

三类：危险性与危害程度一般，感染后的症状较轻，具有预防和治疗措施的微生物菌种，一般不引起实验室感染。脑膜炎奈瑟氏菌、链球菌、淋病奈瑟氏菌、百日咳嗜血杆菌、白喉棒状杆菌、沙门氏菌。志贺氏菌、破伤风棱状杆菌、钩端螺旋体、梅毒螺旋体：乙型脑炎病毒、脊髓灰质炎病毒、流感病毒、流行性腮腺炎病毒、麻疹病毒、风疹病毒。 一、生物安全实验室

1、 BSL-1 ：适用于第四类微生物：不需要特殊的防护屏障，通风橱，必备洗手池，最好

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