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高效液相色谱法测定甘蔗节间果糖、葡萄糖和蔗糖的含量

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198 2011, Vol. 32, No. 02

食品科学※分析检测

高效液相色谱法测定甘蔗节间果糖、

葡萄糖和蔗糖的含量

逯平杰1,代容春1,叶冰莹1,2,林荣华1,2,何文锦1,2,陈由强1,2,3,*,陈如凯3

(1.福建师范大学生命科学学院,福建 福州 350108;2.发育与神经生物学福建省高等学校重点实验室,福建 福州

350108;3.农业部甘蔗遗传改良重点开放实验室,福建 福州 350002)

摘 要:研究高效液相色谱(HPLC)示差折光检测法测定甘蔗节间糖含量,建立一种简便、快速和准确可靠的,能同时测定果糖、葡萄糖、蔗糖含量的高效液相色谱法。HPLC方法采用Agilent Zorbax carbohydrate柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(75:25,V/V),流速1.0mL/min,柱温30℃,检测器温度35℃。该法相对标准偏差(RSD)为0.82%~0.87%(n=5),加标回收率为97.84%~99.12%,糖类质量浓度在0.625~20mg/mL内呈现良好的线性关系,相关系数在0.9982(n=6)以上。采用本法测定两种甘蔗品种不同时期、不同节间糖含量,均获得满意结果。

关键词:高效液相色谱法;甘蔗节间;果糖;葡萄糖;蔗糖

HPLC Determination of Fructose, Glucose and Sucrose in Sugarcane Internode

LU Ping-jie1,DAI Rong-chun1,YE Bing-ying1,2,LIN Rong-hua1,2,

HE Wen-jin1,2,CHEN You-qiang1,2,3,*,CHEN Ru-kai3

(1. College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou 350108, China;2. State Key Laboratory of Developmental Biologyand Neruobiology, Institution for Higher Learning in Fujian, Fuzhou 350108, China;3. Key Laboratory of Sugarcane Genetic

Improvement, Ministry of Agriculture, Fuzhou 350002, China)

Abstracts:Fructose, glucose and sucrose contents in sugarcane internodes were determined using high performance liquidchromatography with refractive index detector (RID). The chromatographic separation was achieved on an Agilent Zorbaxcarbohydrate column (4.6 mm× 250 mm, 5μ m), which was held at a constant temperature of 30 ℃, using a mobile phase composedof acetonitrile and water (75:25, V/V) at a flow rate of 1.0 mL/min. RID temperature was set as 35 ℃. Average spike recoveriesfor 5 replicate determinations of three saccharides were found in a range of 97.84% to 99.12%, with a relative standard deviation(RSD) between 0.82% and 0.87%. The developed calibration curves displayed good linearity over a concentration range of 0.625to 20 mg/mL, with a correlation coefficient exceeding 0.9982 (n = 6). This method has been applied to determine two differentvarieties sugarcane internodes with satisfying results.

Key words:HPLC;sugarcane internode;fructose;glucose;sucrose

中图分类号:TS207.3 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2011)02-0198-03

甘蔗是我国最重要的糖料作物,它不仅是食糖业的重要原料,而且是能源、化工、酿酒和饲料的原料[1]。甘蔗节间含有较高的糖分,主要是葡萄糖、果糖和蔗糖,且不同生长时期、不同节间甘蔗糖分含量存在较大差异[2]。测定甘蔗不同时期、不同节间糖含量,分

析糖分积累的规律,进而运用统计分析的方法了解蔗糖分积累与糖代谢相关酶活性变化之间的关系,从生理生化方面探讨甘蔗生长和糖分积累的规律,并为甘蔗高产高糖栽培及遗传改良等提供理论依据。

糖含量的测定方法有比色法[3-5]、旋光法[6]、气相色

收稿日期:2010-03-06

基金项目:国家自然科学基金项目(30871575);国家“863”计划项目(2007AA100701); 国家现代农业技术体系建设专项(nycytx-024-01-20)

作者简介:逯平杰(1984—),男,硕士研究生,主要从事植物生理与分子生物学研究。E-mail:lpj124@

*通信作者:陈由强(1956—),男,教授,博士,主要从事植物生理生化和分子生物学研究。E-mail:yqchen@

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