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毛细管电泳法快速测定齐墩果酸片的含量

时间:2012-08-21 20:24 来源:未知 手机版
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                          作者:黄雅燕,肖美添,叶静,汤须崇 

【摘要】    目的 建立快速测定齐墩果酸片含量的方法。方法 采用毛细管电泳法,未涂层弹性石英毛细管(75 μm×50 cm,有效长度40 cm);压力进样,压力:3.0 kPa;进样时间:5 s;分离电压:25 kV;柱温:25 ℃;检测波长:200 nm;运行缓冲液:含5%(体积分数)甲醇的20 mmol·L-1硼砂溶液(pH 9.4);运行时间:10 min。结果 齐墩果酸的线性范围为 2.58~660 μg·mL-1(r=0.999 7),平均回收率为99.47%,RSD为1.28% (n=6)。结论 方法准确、快速、简便,适于齐墩果酸片的含量测定。

【关键词】  齐墩果酸片 毛细管电泳 含量测定

  Abstract:Objective To establish an HPCE method for rapid monitoring the content of oleanolic acid in oleanolic acid tablets. Methods Samples were analyzed on a fused and uncoated silic capillary of 75 μm×50 cm (40 cm of effective length). 20 mmol·L-1 of borax containing 5% methanol was used as running buffer. Samples were injected hydrodynamically (5 s, 3.0 kPa) into the capillary. The applied voltage was 25 kV and the detection wavelength was set at 200 nm. The temperature was kept at 25 ℃. The running time was 10 min. Results The calibration curve was linear in the range of 2.58-660 μg·mL-1(r=0.9997) for oleanolic acid. The average recovery (n=6) was 99.47% with RSD 1.28%. Conclusion This method is accurate, rapid, and simple for the content determination of oleanolic acid.

  Key words: oleanolic acid tablet; HPCE; content determination

  齐墩果酸片具有护肝降酶、抗炎、强心利尿、抗肿瘤等作用,临床上除广泛应用于急、慢性肝炎的辅助治疗外,也用于配合肿瘤病人的手术、放疗、化疗,促进免疫功能恢复以及再生障碍性贫血、红斑狼疮等免疫缺陷性疾病。目前国内有许多厂家生产齐墩果酸片,生产上采用酸碱非水滴定法[1]测定其含量,但该方法终点不易掌握,专属性差,误差较大。也有采用比色法[2]、薄层扫描法[3]、HPLC法[4]等测定齐墩果酸片的含量,但以上方法均存在费时长、样品用量多、操作繁琐等问题。而毛细管电泳法具有高效、快速、准确、操作简便、样品用量少等优点,适合快速分析样品[5]。笔者采用毛细管电泳测定齐墩果酸片中有效成分的含量,结果方法快速、灵敏、简便、结果准确。

  1  仪器与试药
      
  俄罗斯Lumex CAPEL105型毛细管电泳仪,紫外检测器,弹性石英毛细管(直径75 μm,总长50 cm,有效长度40 cm,河北永年光导纤维厂)。
      
  齐墩果酸对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号:110709200304);齐墩果酸片(山西亨瑞达制药有限公司,批号:060102、060106、060507、060906,规格为20 mg·片-1);硼砂(Na2B4O7·H2O)、硼酸、乙醇、甲醇、乙腈均为分析纯,实验用水为重蒸水。

  2  方法与结果

  2.1  分离条件
      
  进样方式,压力进样,压力3.0 kPa,进样5 s;分离电压为25 kV(恒压分析);柱温25 ℃;紫外检测波长200 nm;以含5%(体积分数)甲醇的20 mmol·L-1 硼砂溶液(pH 9.4)为运行缓冲液。实验前,毛细管依次用0.1 mol·L-1 盐酸、重蒸水、0.1 mol·L-1NaOH溶液、重蒸水各冲洗5 min,然后用运行缓冲液冲洗3 min。在每2次运行之间,毛细管用0.1 mol·L-1NaOH溶液冲洗2 min,重蒸水和运行缓冲液各冲洗3 min。试验前运行缓冲液用0.22 μm滤膜过滤和超声波脱气。齐墩果酸对照品和齐墩果酸片样品的色谱图见图1。
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