土壤酶活性测定方法(2)

称取2 g土壤，置于50mL三角瓶中，注入15ml 8%蔗糖溶液，5ml pH 5.5磷酸缓冲液和5滴甲苯。摇匀混合物后，放入恒温箱，在37℃下培养24h。到时取出，迅速过滤。从中吸取滤液1ml，注入小试管中，加3ml DNS试剂，在沸腾的水浴锅中加热5min，随即将试管移至自来水流下冷却3min。溶液因生成3-氨基-5-硝基水杨酸而呈橙黄色，最后将试管内液体转移至100ml容量瓶中，并用蒸馏水定容稀释至50ml。在分光光度计上于508nm处进行比色。

为了消除土壤中原有的蔗糖、葡萄糖而引起的误差，每一土样需做无基质对照，整个试验需做无土壤对照；如果样品吸光值超过标曲的最大值，则应该增加分取倍数或减少培养的土样。 四、结果计算：

蔗糖酶活性以24h，1g干土生成葡萄糖毫克数表示。 蔗糖酶活性=（a样品－a无土－a无基质）*V*n/m

a样品、a无土、a无机质分别表示其由标准曲线求的葡萄糖毫克数； V为显色体积； n为分取倍数； m为土重。

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