UVWin5.0 使用指南 紫外分光光度计使用说明书(8)

30 UVWin5.0 使用指南

窗口中共有三个选项卡，分别是：【测量】、【仪器】和【附件】。其中，测量选项卡中的内容是设置扫描参数的主要内容，另外两个选项卡的内容与仪器性能和附件设置窗口中的内容完全相同。有关仪器性能和附件设置窗口的内容，请参阅3.1仪器性能和3.7附件设置，在这里就不再重复论述了。下面着重介绍光谱扫描参数的设置方法。 光谱扫描光度模式

设置光谱扫描的【光度模式】。光度模式是指仪器当前运行的模式，可供选择的光度模式有：Abs（吸光度模式）、T%（透过率模式）、Es（能量模式－样品光）、Er（能量模式－参比光）、R%（参比光透过率－积分球附件专用）。如果您选择了能量方式（Er、Es），还可以点击【能量】按钮对能量参数进行设置。 显示范围

设置光谱扫描图形中纵坐标的范围。您可以在【最大】和【最小】编辑框中输入相应的数值。 扫描参数

设置扫描的波长范围、间隔、速度等参数。【起点】和【终点】构成了扫描范围。【速度】表示扫描速度。扫描速度越快，数据的质量相对越不好；扫描速度慢，数据的质量相对越好。【间隔】表示扫描的波长间隔。也就是间隔多少纳米采一次样。可选的扫描间隔有：0.1、0.2、0.5、1.0、2.0和5.0nm。【自动间隔】的作用是根据您设置的扫描范围来为您自动选择一个扫描间隔。 扫描方式

扫描方式是设置光谱扫描的重复扫描方式。【单次扫描】表示只进行一次扫描，不重复。【重复扫描】表示可进行多次重复扫描。【自动扫描】是根据您选择的附件样品池的数量进行扫描。如果您选择了重复扫描，则需要设置扫描的【时间间隔】和【重复次数】。如果您选择了自动扫描，则不需要设置重复次数，只要设置时间间隔就可以了。

5.3 光谱扫描

选择【测量】菜单下的【开始】子菜单，或点击“”按钮，即可开始光谱扫描。在扫描过程中，系统会将扫描的数据和波长以图形的方式动态绘制在光谱扫描窗口中，另外，还会将数据显示在工具栏中。如果您要终止扫描，可点击“停止”按钮或按ESC键。

5.4 查看光谱信息

选择【图形】菜单下的【光谱信息】子菜单，或点击“”按钮，即可打开光谱信息窗口。如图 5-2所示。在此窗口中，所有扫描的光谱将以列表的形式进行显示。您可以任意点击一条光谱，在其右侧的详细信息窗口中将会显示其详细信息。您还可以点击“颜色”按钮来改变对应光谱的颜色。

图 5-2 光谱信息窗口

第5章 光谱扫描 31 5.5 保存和打开光谱文件

如果您想保存扫描光谱，可选择【文件】菜单下的【保存】子菜单，或点击“”按钮，在弹出的保存窗口中输入要保存的文件名，然后点击【确定】按钮即可。当您要浏览保存过的光谱文件时，可选择【文件】菜单下的【打开】子菜单，或点击“”按钮，此时系统将弹出打开光谱文件窗口。如图 5-3所示。

图 5-3 打开光谱文件窗口

在此窗口中，您可以选择需要打开的光谱文件。右侧的谱图为预览窗口。点击【属性】按钮可以查看光谱文件的详细信息。

5.6 本章小结

本章主要讲述了UVWin5.0中有关光谱扫描的一些内容。相信您对光谱扫描的使用方法已经有了一定的了解。希望您能够结合仪器的使用逐渐熟悉软件的使用方法。

第6章 定量测定

本章要点

在本章中，我们将主要讲述以下内容：什么叫做定量测定，如何设置定量测定的参数，如何进行定量测定，如何保存测量文件。

具体包含以下内容： ? 定量测定简介 ? 定量测定参数设置 ? 定量测定 ? 保存测量文件 ? 本章小结

6.1 定量测定简介

定量测定是用待测样品的测量值与标准样品的测量值进行比对，最后计算出待测样品的浓度值的一种测定方法。定量测定可分为单波长定量、双波长定量、三波长定量、一次微分定量、二次微分定量、三次微分定量等诸多的测量方法。

6.2 定量测定参数设置

激活定量测定窗口，选择【测量】菜单下的【参数设置】子菜单，或点击“”按钮，即可打开定量测定设置窗口。如图 6-1所示。

图 6-1 定量测定参数设置

第6章 定量测定 33

窗口共有五个选项卡，分别是：【测量】、【校正曲线】、【仪器】、【附件】和【质量控制】。其中，仪器和附件的内容与仪器性能和附件设置窗口的内容完全一致，请参阅3.1仪器性能和3.7附件设置。 测量选项卡

测量选项卡主要提供定量测定的方法设置、波长设置和重复测量设置等。您可以选择不同的测量方法来完成不同的定量要求。同时还可以设置样品编号和测量重复次数。如上图所示。

? 测量方法

设置定量测定的测量方法。可选的测量方法有：【单波长法】、【双波长法】、【双波长系数法】、【三波长法】、【一次微分法】、【二次微分法】、【三次微分法】和【四次微分法】。您可以根据不同的测试要求对方法进行选择。如果您选择了单波长法，则需要在【主波长】编辑框中输入测定波长。如果您选择了双波长或三波长法，则需要在【基线波长1】和【基线波长2】编辑框中输入基线波长。有关定量测定方法的详细介绍，请参阅 附录A 定量测定的应用方法。

? 样品编号

设置标准样品和未知样品的标识名称及编号。 ? 其他设置

在其他设置中，您可以设置对样品进行重复测量。重复测量是对一个样品进行多次测量，然后取多次测量结果的平均值进行含量计算。因此，如果您选择了【重复测量】选项，还需要在【重复次数】编辑框中输入需要重复测量的次数，这样才能够达到重复测量的目的。重复测量可使测量的数据更为准确，但测量所花费的时间要比正常测量梢长一些。另外，如果您的仪器配有多联样品池，您还可以选择【自动切换样品池】选项。这样，系统会每测量一个样品就自动切换到下一个样品池，您只需要将样品按照顺序放置与样品池中即可。

校正曲线选项卡

校正曲线选项卡允许您对校正曲线的参数进行设置。可设置的参数包括：【曲线方程】、【方程次数】、【浓度单位】、【零点插入】、【曲线评估】、【校正方法】等。如所示。

图 6-2 校正曲线设置

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? 曲线方程

设置校正曲线所使用的方程。可选的方程有两个，分别是：C=f(Abs)和Abs=f(C)。前者是以吸光度做为变化量来求解浓度值。而后者是前者的反函数，主要用于吸收系数的计算。

? 方程次数

方程次数表示校正曲线所使用的方程的次数，也可以称为阶数。就是我们常说的“一元二次方程”、“一元三次方程”中的“二次”和“三次”，主要是指方程中变化量的最高次数。可选的方程次数有：【一次】、【二次】、【三次】和【四次】。其中，一次方程也可以称“线性方程”，其他的则称为“非线性方程”。由于紫外可见分光光度计的测光准确度和重复性都比较好，在允许的吸光度范围内其测量的数据与浓度值基本程线性变化，因此，线性方程应用得比较广泛。您可以根据实际情况来对曲线方程进行选择。如图 6-3和图 6-4所示。

图 6-3 线性校正曲线

图 6-4 非线性校正曲线

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