高中生物课本黑体字大盘点(6)

便于消毒。

(4)培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季的花药培养不需光照，而在后期均需光照。

五、DNA和蛋白质技术

1．比较细胞内DNA复制与PCR技术的不同

项目 场所 能量 DNA复制 细胞内 ATP提供能量 解旋酶、酶 DNA聚合酶 录 产生引物 PCR技术 细胞外 不需ATP提供能量 耐高温的TaqDNA聚合酶 是否有转伴有转录，无转录，需加入两种引物 引物 温度 RNA 体内温和条件 边解旋边复制， 半保留复制 受生物体自身控制 DNA或RNA 高温 特点 体外迅速扩增 循环次数 30多次 2.PCR技术 (1)反应过程

①变性：当温度上升到90 ℃以上时，双链DNA解聚为单链，如下图：

②复性：当温度下降到50 ℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，如下图：

③延伸：当温度上升到72 ℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，如下图：

(2)结果

①PCR一般要经历三十多次循环，每次循环都要包括变性、复性、延伸三步。

②两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。

六、DNA的粗提取和鉴定方法

(1)材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织。

(2)破碎细胞

①动物细胞：易破碎，可通过吸水破裂。 ②植物细胞：加入洗涤剂、食盐后研磨。 (3)除去杂质的方法

方法一：利用DNA在不同浓度的NaCl溶

液中溶解度的不同，通过调节NaCl溶液的浓度除去溶于和不溶于NaCl溶液中的杂质。

方法二：利用DNA对酶的耐受性，直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10～15 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，而不会破坏DNA。

方法三：利用DNA对高温的耐受性，将滤液放在60～75 ℃的恒温水浴箱中保温10～15 min，使蛋白质变性沉淀而DNA分子还未变性。

(4)DNA的析出：向处理后的滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液(体积分数为95%)，静置2～3 min，溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物。

(5)DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

七、提取血红蛋白过程中样品的预处理及粗分离

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