临床检验仪器学教案(10)

毛细管凝胶电泳是将板上的凝胶移到毛细管中作支持物进行的电泳。适用于分离、测定肽类、蛋白质、DNA类物质的分离。CGE正在向第二代DNA序列测定仪发展，并将在人类基因组计划中起重要作用。 4.5.4.3毛细管胶束电动色谱

毛细管胶束电动色谱又称微团电动毛细管层析，该技术的最大特点是使毛细管电泳有可能在用于离子型化合物分离的同时进行中性物质的分离，加强了毛细管电泳的选择项，弥补了中性分子分离方向的不足。因此在各个领域特别是生物药物领域显示了广泛的应用前景。 4.5.4.4毛细管等电聚焦电泳

毛细管等电聚焦电泳是在电场作用下，带电的分子会在电解质中作定向的迁移，毛细管的等电聚焦是在毛细管内实现的等电聚焦过程，具有极高的分辨率，通常可以分离等电点差异小于 0.01pH单位的两种蛋白质，例如肽类、蛋白质的分离。

4.5.4.5毛细管等速电泳

毛细管等速电泳是一种较早采用的模式，是电泳中唯一的分离组分与电解质一起向前移动的同时进行分离的电泳方法。常用于分离小离子、小分子、肽类及蛋白质。

4.5.4.6毛细管电色谱

毛细管电色谱它包含了电泳和色谱两种机制，是在毛细管中填充或在毛细管壁上键合（或涂壁）固定相，从而构成毛细管色谱柱，依靠电渗流推动流动相，携带样品迁移，根据样品分子的质荷比、分子尺寸及分配系数的差别而分离。它与色谱法的不同在于，流动相通道色谱柱的推动力是电场力，而不是压力。它与区带毛细管电泳法的区别是具有电泳与色谱二种作用力，因此适用范围更广泛。 4.5.5毛细管电泳仪的基本结构

毛细管电泳仪的结构并不复杂，主要有高压源、毛细管柱、检测器，以及两个供毛细管两端插入而又可和电源相连的缓冲液槽。输出讯号和记录装置相连，记录装置可以是一个普通的记录仪、积分仪，也可以是有控制功能的计算机工作站。图6-4是毛细管电泳仪装置示意图。

图6-4毛细管电泳仪装置示意图

4.5.5.1毛细管柱

毛细管是毛细管电泳仪的核心部件，毛细管电泳的分离过程主要在毛细管内完成。毛细管柱通常都是圆管型的，理想的毛细管柱应是化学和电惰性的，紫外和可见光可以透过，易于弯曲，有一定的柔性，耐用而且便宜。 4.5.5.2检测器

4.5.5.3毛细管电泳法的进样技术 4.5.6常用各种电泳仪简介

稳压稳流电泳仪、全自动醋纤膜电泳仪、全自动荧光/可见光双系统电泳仪、全自动琼脂糖电泳仪、双向电泳及双向电泳-液相色谱-质谱联用、高效毛细管电泳及高效毛细管电泳-质谱联用、毛细管电泳芯片、DNA测序系统 4.6电泳仪临床应用 4.6.1血清蛋白电泳

血清中的蛋白质构成了血清溶解物的绝大部分，其中有载体蛋白质、抗体、酶、酶抑制剂、凝血因子。新鲜血清经醋酸纤维薄膜或琼脂糖电泳、染色后，通常可见5条带，即清蛋白、a1、a2、b和g球蛋白。 4.6.2 尿蛋白电泳

临床进行尿蛋白电泳的主要目的是：①确定尿蛋白的来源；②了解肾脏病变的严重程度（选择性蛋白尿与非选择性蛋白尿），从而有助于诊断和预后的判断。 4.6.3血红蛋白及糖化血红蛋白电泳

应用电泳法鉴别患者血液中Hb的类型及含量，对于贫血类型的临床诊断及治疗具有重大意义。 4.6.4免疫固定电泳

可对各类Ig及其轻链进行分型，最常用于临床常规M蛋白的分型与鉴定。 4.6.5 同工酶电泳 4.6.6脂蛋白电泳

脂蛋白电泳检测各种脂蛋白（包括胆固醇和甘油三酯）主要用于高脂血症的分型、冠心病危险性估计，以及动脉粥样硬化性及相关疾病的发生、发展、诊断和治疗（包括治疗性生活方式改变、饮食及调脂药物冶疗）效果观察的研究等。 4.7电泳技术的质量控制 4.7.1 电泳分析前的质量控制

电泳分析前的质量控制是指电泳操作前所可能存在或出现的误差以致影响电泳的结果，包括选择标本采集、标本保存、电泳方法、电泳试剂保存等。 4.7.2电泳分析中的质量控制 4.7.3电泳分析后的质量控制

第七章 电化学分析技术和临床相关仪器

1.基本要求 1.1 了解

（1）常用的电解质分析仪和血气分析仪。 （2）电解质分析仪和血气分析仪的日常维护常识。 （3）电解质分析仪和血气分析仪的常见故障排除方法。 1.2 熟悉

（1）pH电极、PCO2电极、PO2电极和参比电极的使用方法。 （2）电解质分析仪和血气分析仪的应用方法。

1.3 掌握

（1）pH电极、PCO2电极、PO2电极和参比电极的基本结构和工作原理。 （2）电解质分析仪和血气分析仪的工作原理和组成结构。 2 重点难点 2.1重 点

电解质分析仪和血气分析仪的工作原理和组成结构、应用方法。 2.2 难点

电解质分析仪和血气分析仪的组成结构、应用方法。 3.讲授学时 建议8~10学时 4.内容提要

电化学临床分析仪器是利用电化学分析技术而设计的临床分析仪器。溶液的电化学性质是指电解质溶液通电时，其电位、电流、电导和电量等电化学特性随化学组分和浓度而变化的性质。电化学分析法是建立在溶液电化学性质基础上并利用这些性质，通过电极这个变换器，将被测物质的浓度转变成电学参数而进行检测的方法。 4.1 电化学分析原理 1.pH值测定原理

pH值测定常用参比电极为正极，以指示电极为负极，组成一个电化学电池，通过测量电池的电动势E而测得相应溶液的pH值。常用的指示电极是pH玻璃膜电极。玻璃电极对溶液pH的敏感程度取决于电极的玻璃膜。在一定温度下，玻璃电极的电极电位与被测溶液的pH值有线性关系：

（7-1）

式中R为气体常数，F为法拉第常数，T为热力学温度，K玻在测量条件下恒定时为常数。

2. 离子选择性电极工作原理

离子选择性电极是一种用特殊敏感膜制成的，对溶液中特定离子具有选择性响应的电极。ISE可测量pH值，Na+、K+、Cl-、Ca2+、Mg2+等离子的活度或浓度。

离子选择性电极通常由电极管、内参比电极、内参比溶液和敏感膜四个部分组成。离子选择性电极的电极电位可表示为：

式中，阳离子选择性电极为＋，阴离子选择性电极为－；n为离子电荷数；Cx为被测离子浓度；fx为被测离子活度系数；K在测量条件恒定时为常数。公式表明，在一定条件下，离子选择性电极的电极电位与被测离子浓度的对数呈线性关系。 ISE与参比电极共同浸入样品试液中构成一个原电池，通过测量原电池的电动势E，便可求得被测离子的活度或浓度。 3. 氧分压（PO2）电极的工作原理

PO2电极是氧化还原电极，对氧的测量是基于电解氧的原理实现的。PO2电极由铂丝阴极与银-氯化银阳极组成，称为Clark电极。待测溶液中的O2可以借助电极外表面的O2渗透膜，依靠PO2梯度透过膜而进入电极。在外加电压为0.4V~0.8V范围内时，O2在铂阴极表面被还原，电极电流随外加电压的增加而增加。当氧浓度扩散梯度相对稳定时，就产生一个稳定的电解电流，称之为极限扩散电流。极限扩散电流的大小决定于渗透到阴极表面氧的多少，后者又取决于膜外的PO2。因此，通过测定电流变化即可测定血液标本中的氧气分压。

在外加电压超过0.8V时，即使PO2=0 mmHg，水本身也会被电解而产生电流。因此，外加在PO2电极上的工作电压通常为0.65V。 4. 二氧化碳分压（PCO2）电极的工作原理

PCO2电极是气敏电极，是由pH玻璃电极和银-氯化银电极组装在一起的复合电极。复合电极内装有PCO2电极外缓冲液（含NaHCO3-NaCl），它的pH可以因血液的PCO2而改变。 4.2 电解质分析仪 1. 电解质分析仪的分类

（1）按自动化程度分类 分为半自动电解质分析仪和全自动电解质分析仪。 （2）按工作方式分类 分为湿式电解质分析仪和干式电解质分析仪。临床上最常用的电解质分析仪是湿式电解质分析仪，它将离子选择性电极和参比电极插入被测样品中组成电池，然后通过测量原电池电动势进行测试分析。干式电解质分析仪是采用基于离子选择的差示电位法进行分析测试。

（3）常见电解质分析仪分类 电解质分析仪主要检测K+、Na+、Cl-，部分检测

百度搜索“77cn”或“免费范文网”即可找到本站免费阅读全部范文。收藏本站方便下次阅读，免费范文网，提供经典小说综合文库临床检验仪器学教案(10)在线全文阅读。