织或血液中植人具有半透膜的探针,微量灌流泵使灌流液以一定的流速流经探针,灌流液和细胞外液中待测物质达到一个动态平衡。待测物质被微透析管内连续流动的灌流液不断带出后储存在样品收集器中,通过分析透析液,就可以了解细胞外液中的外来成分及其浓度和代谢变化;出导管也可以在线连接高效液相色谱仪(HPLC)、高效毛细管电泳(HPCE)、质谱(MS)等检测仪器,直接进行在线检测,从而找出中药在体内分布的确切有效成分,最终实现对中药有效成分的筛选。通过微透析技术以及与现代分析技术的联用来分析给药后血液和各个器官组织细胞外液中的成分,确定中药在体内直接作用物质的思想,不仅体现了中医中药的理论特色,而且能较真实反映中药作用多成分、多靶点特点,较好地克服了目前中药有效成分研究中的缺陷。因此,微透析技术在中药有效成分筛选领域中的应用前景是十分广阔的,不失为一种很好的手段。
目前还没有这面的理论研究以及相关报道,但是由于其具有众显而易见的优点,能克服当前许多中药有效成分究方法的不足。因此,微透析技术在中药有效成分筛选中的应用前景是十分乐观的,它为中药有效成分筛选提供了一个新的研究思路和方法,为创新中药的质量控制体系提供一种技术手段,同时也为阐明药物的作用过程、机理以及靶向性提供依据。随着微透析技术的不断发展和延伸,它必将给药学工作者在中药有效成分筛选研究领域中开辟出一片更为广阔的天地。
5、微透析技术的优点
与传统的体内药物分析取样方法如血液或组织匀浆取样等方法相比,微透析取样技术具有以下显著优势:5.1直接在作用部位取样,从而提供更多有关作用部位的真实信息,克服了以往血液或组织匀浆取样只能反映药物在体内的笼统信息的缺点;5.2可根据待测物质的分子量来选择不同的透析膜,从而使样品不含蛋白质、酶等大分子物质,只含游离的药物,样品无需复杂的分离净化处理,可以直接测定;5.3无体液损失,组织损伤小,不破坏机体完整性;5.4可进行持续取样,在单个动物中研究药物的整个经时代谢变化过程,从而能在减少动物使用量的基础上获得有关药物代谢中间过程的信息;5.5可在同一脏器的不同区域或多个脏器同时取样,同时研究药物在同个脏器中不同区域或不同脏器的分布和代谢,能较真实反映中药作用多成分、多靶点特点。5.6可在清醒、自由活动的动物个体上取样,在接近正常生理条件下得到实验结果,更有科学性和实际意义;5.7能与多种分析仪器(如HPLC、HPCE、MS等)联用,实现在线持续分析。
6、微透析技术的不足之处
虽然微透析有以上的众多优点,但它的不足也是易见的:6.1由于该技术存在回收率测定的问题,影响了对实际浓度的测知。6.2因采集样本量极少,对检测手段的要求极高。6.3由于必须采集足够的透析样品,使得透析结果不能反映机体相关物质的瞬时变化。6.4目前,市售微透析产品多为进口,价格昂贵,对实验研究十分不利。 7、前景与展望
目前,微透析技术已成为一种最重要、最有发展前景的取样技术。由于该技术的显著特点,其应用范围将会越来越广泛。尤其是随着微透析技术的日趋成熟和分析方法的发展,无疑会使微透析技术在中医、中药和针灸对疾病的诊断和监测及治疗等方面发挥更巨大的作用。随着新型探针的不断问世,使微透析技术能广泛应用于基础研究和临床研究,从而促进中医事业的蓬勃发展。
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