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安徽省示范高中皖北协作区高三第19(3月)联考理综生物试题 - 图(3)

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选纯化(或便于菌种分散)。采用平板划线法纯化细菌时,要注意不能将最后一区的划线与第一区相连,即D区划线不要与A(或A、B)区相连。

(3)据题可知,培养基中唯一的磷源应是难溶性磷酸盐。据种群的概念,在一定的自然区域内,同种生物的全部个体形成种群,故培养基上出观的单一菌落可以看做一个种群。根据实验原理中“透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小”,结合表格数据可以确定解磷能力最强的菌株是 B3-5-6。 12. 【生物——选修3:现代生物科技专题】

草鱼病毒性出血病是由草鱼呼吸孤病毒(GCRV)引起的,目前尚未找到防治药物。下图是通过基因工程方法将PV7双基因与某质粒连接,并通过草鱼攻毒实验检测免疫保护效果的过程示意图。图中P10和PH为启动子,箭头表示转录方向。PV71和PV72为GCRV外壳蛋白基因(DNA片段)。请回答下列问题:

草鱼病毒性出血病核酸疫苗实验鱼的死亡率和免疫保护率记录表 组别 1 2 3 空载体 对照 疫苗注射量 10μg 30μg 60μg 30μg 0 实验鱼数 20尾 20尾 20尾 20尾 20尾 死亡鱼数 0尾 0尾 1尾 6尾 20尾 死亡率 0 0 5% 30% 100% 免疫保护率 100% 100% 95% 70% 0 (1)制备草鱼病毒性出血病核酸疫苗,获取大量PV7双基因时可采用PCR技术进行扩增,该技术除需要原料、模板、_____________外,还必须用____________酶。PCR一般要经历三十次以上的循环,每次循环包括变性、复性和延伸三个阶段,其中变性是指____________条件下,DNA分子____________的过程。

(2)使用不同的限制酶切割PV71和PV72基因,是为了防止____________,用不同限制酶先后两次切割质粒,是为了防止____________,有利于提高核酸疫苗构建的成功率。

(3)攻毒实验检测是指将不同浓度的核酸疫苗导入草鱼体内,通过转录和翻译产生草鱼呼肠孤病毒外壳蛋白,使草鱼生成抗体和记忆细胞,同时给草鱼注入相同浓度的GCRV,我,统计草鱼免疫保护率,实验结果说明____________。导入空载体(普通质粒)的草鱼免疫保护率达到70%,但草鱼体内并未检测到抗体水平的明显增加,可能的原因是

________________________。核酸疫苗注射后,科学家发现PV7双基因在启动子的驱动下持续表达,至第49天核酸疫苗仍没有被降解,仍能检测到PV7双基因的转录。综上所述,与常规基因工程生产的蛋白质疫苗相比,核酸疫苗所具备的优点有________________________。 【答案】 (1). 引物 (2). 热稳定DNA聚合(或Taq) (3). 高温(或90—95℃、受热) (4). 解旋(为单链) (5). 连接的位置错误 (6). 质粒自身环化 (7). 核酸疫苗起到了保护草鱼、预防草鱼病毒性出血病的作用 (8). 导入草鱼体内的空载体(普通质粒)能提高草鱼的非特异性免疫能力 (9). 抗原性强、保护时间长、安全性好、制备和运输方便(答出两种即可给分)

(2)启动子P10能启动PV71基因的转录,PH能启动PV72基因的转录,用不同的限制酶切割质粒PV71、PV72 基因是为了防止连接位置错误,用不同的限制酶先后两次切割质粒,是为了防止质粒向身环化,还有利于提高核酸疫苗构建的成功率。

(3)实验结果说明核酸疫苗起到了保护草鱼、预防草负病毒件出血病的作用,导入空载体(普通质粒),草鱼体内并未检测到抗体水平的明显增加,可能的原因是空载体(普通质粒)能提高草鱼的非特异性免疫能力,所以免疫保护率提高。与常规基因工程生产的蛋白质疫苗相比,核酸疫苗具有抗原性强、保护吋问长、安全性好、制备和运输方便等优点。

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