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草原生态化学实验讲义-2007(4)

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关闭消煮器,取下消化管,冷却。

3)定容:冷却后,移入150ml容量瓶中,以蒸馏水定容至刻度,充分摇匀。

4)调pH:准确吸取1-2ml样品消化液,另取与消化液相同体积的空白溶液同样处理。置于50ml容量瓶中,加酚酞1滴,用4%氢氧化钠溶液调至溶液显红色,再用2%的硫酸溶液调至红色刚退。 5)显色:给容量瓶中加5ml钼锑抗显色剂,定容至刻度,充分摇匀,静置半小时显色。 6)比色:在721型分光光度计上于波长660nm处测定吸光度。

7)标准曲线的绘制:取7个50ml容量瓶,分别编号为0,1,2,3,4,5,6。依次加入磷标准溶液(5mg/L)0,1,2,3,4,5,6ml,显色、比色同5,6步骤。以μg/ml含磷量为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。 1.5数据处理 表1:样品中磷的含量 样品名称 样品编好 硝化管 编号 纸+样重 纸重 样重 吸光度值 浓度值(vg/ml) P(g/kg) 硝化液定容体积(ml) 比色时吸取硝化液体积(ml) 显色体积(ml) 磷的含量:

p%??g?Vp?V总V?10?61W?100%式中:

μg—根据测定的吸光度(A)在标准曲线上查出的磷的含量(μg /ml);

Vp—显色液定容体积,ml; V总—消化液定容体积,ml; V1—比色时吸取消化液体积,ml; W—风干样品重×(1-γ%),g; 2.草—畜系统磷存留率的计算 表2:磷的存留率 测定项目 采食量kg 排粪量kg 排尿量ml 牧草中磷的含量 测定结果 测定项目 粪中磷的含量 尿中磷的含量 磷的存留率% 测定结果 1)家畜食入总磷量(以烘干样为基础):

P草 = W草 ×(1-γ%)× P’草

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P草—家畜食入总磷量,g; W草 —家畜食入牧草总量,kg;P’草—牧草含磷量,g/kg; 2)家畜粪中排出总磷量(以烘干样为基础):

P粪 = W粪×(1-γ%)× P’粪

P粪—家畜粪中排出总磷量,g; W粪—家畜排出粪便的总重量,kg;P’粪—家畜排出粪便中的含磷量,g/kg; 3)家畜尿中排出总磷量:

P尿 = V尿× P’尿

P尿—家畜尿中排出总磷量,g;V尿—家畜排出尿的总量,ml;P’尿—家畜排出尿中的含磷量,g/ml; 4)草—畜系统磷的存留率:

P草-畜% = (P草-P粪-P尿) *100%/P草

P草-畜%— 草—畜系统磷的存留率;P草—家畜食入总磷量,g;P粪—家畜粪中排出总磷量,g; P尿—家畜尿中排出总磷量,g。

实验七、草—畜系统矿物元素(K、Na、Mn、Zn、Cu)流的测算(9.0学时)

(以钾为例) 一、目的:

通过测算试验区内牧草产量、饲喂家畜排泄物的量及其钾等元素的含量,了解钾等元素在草—畜系统的转化存留率。 二、原理:

测定试验区内牧草的产量和含钾率,并测算出该区域内的牧草可食部分的总量,以此推算出牧草可食部分钾的存留量;测定家畜排出的粪、尿总量和含钾率,可计算出家畜在一定时间内排出的总钾量,然后计算出草—畜转化阶钾的转化率。 三、实验内容:

1.火焰光度法测定牧草、粪、尿中钾和钠的含量;

2.原子吸收分光光度法测定牧草、粪、尿中锰、锌合铜的含量。 3.草—畜系统矿物元素(K、Na、Mn、Zn、Cu)流的计算 四、操作步骤

1.火焰光度法测定牧草、粪、尿中钾和钠的含量 1.1目的:

1)掌握测定牧草饲料中全钾的原理。 2)学会使用火焰光度计。 1.2原理:

火焰光度计是测量某种待测元素通过火焰激发出光谱能量强度的仪器。即将样品经过化学处理制备成简单的待测溶液,用压缩空气使溶液喷成雾状,与乙炔或其他可燃气体混合后燃烧。溶液中的钾、钠等离子发出特殊的发射明线光谱。用滤光板分离选择后,由光电池把火焰发出的光能变成电能,再由检流计量出光电流的大小。光电流的大小与溶液中该元素的含量是呈正相关的,再从同样条件下测定的标准溶液所作的曲线上,查出相对应的浓度而定量。 1.3试剂与主要仪器: 1)试剂:

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氧化钾标准溶液:准确称取经105C烘干4-6小时的氧化钾1.5830克,溶于蒸馏水中,定容至1000ml,摇匀,即为1000ppm氧化钾基准溶液,将此溶液再稀释成500ppm或100ppm。然后再配制5、10、20、30、50、70ppm氧化钾标准溶液系列各250ml。 2)仪器: 火焰光度计 1.4步骤:

1)全钾待测液的制备:同原子吸收光谱分析法测定植物中微量元素铁、铜含量的待测液制备。 2)吸取1ml待测液于10ml试管中,加入4ml蒸馏水,摇匀,在火焰光度计上测定,同时测定一系列相应的标准氧化钾溶液,绘成标准曲线。

3)在方格纸上以氧化钾ppm数为横坐标,检流计读数为纵坐标,绘出曲线,然后用待测液的读数在曲线上查出相应的ppm数。 1.5数据处理:

K2O%=ppm*测定体积*分取倍数*100/[样品重量×(1-γ%)]/10。

式中ppm__从标准曲线上查得氧化钾的ppm数;10—将微克换算成克数;100—换算成百分数; 1.6注意事项:

1、先开空气开关,后开燃气开关,关闭时一定先关燃气开关,后关空气开关,次序绝对不能颠倒,才能达到安全的目的。

2、光电池有疲劳现象,工作半时后应停止使用半小时。

3、同一批待测液测定时,空气压力、燃气压力、光圈大小等应保持不变,否则将会影响结果。若中途因某种原因发生变化,必须用标准溶液校对,或者重新测定一系列标准液。 2.原子吸收分光光度法测定牧草、粪、尿中锰、锌合铜的含量。 2.1目的

1)掌握植物中微量元素的测定方法和原理。 2)学会使用原子吸收分光光度计。 2.2原理

原子吸收光谱法是基于从光源辐射出具有待测元素特征谱线的光(从空心阴极灯发出的锐线光源),通过试样蒸气时被蒸气中待测元素基态原子所吸收,由辐射特征谱线光被减弱的程度来测定试样中待测元素含量的方法。

在实际分析中要求测定的是试样中待测元素的浓度,而此浓度与待测元素吸收辐射的原子总数成正比。在一定浓度范围和一定吸收光程的情况下,吸光度与待测元素的浓度关系为:A=kc 这说明在一定实验条件下,吸光度与浓度的关系是服从比尔定律的。因此,测定吸光度就可以求出待测元素的浓度。 2.3试剂:

1)混酸:硝酸:高氯酸:硫酸=8:1:1

2)铜标准贮存溶液:称取光谱纯的CuSO4.5H2O 1.9648g,于100ml烧杯中,加二次蒸馏水溶解后稀释到500ml的容量瓶中,加入2ml混酸,以二次蒸馏水定容,此溶液的浓度为1000μg/ml。

3)铜标准溶液:准确吸取1000μg/ml铜标准贮存溶液25ml于250ml容量瓶中,以二次蒸馏水定容,此溶液浓度为100 μg/ml。 2.4步骤

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1)待测液的制备:同测定牧草磷的待测液。

2)AAS计测定吸光度值:在AAS计上248.3nm波长处测定铁的吸收值,324.7nm处测定铜的吸收值。 3.工作曲线的绘制:与样品测定完全相同的条件下,在AAS计上测定吸收值作工作曲线。

3) 铜的工作曲线:分别吸取100μg/ml铜标准溶液0.00、0.5、1.5、2.5ml分别置于4个50ml容量瓶中,以水定容。铜系列标准溶液的浓度即为0.0、1.0、3.0、5.0 μg/ml。 2.5数据处理 铜的含量

?(Cu)???VW式中:ω(Cu)—植物中全铜的质量分数,mg/kg;ρ—测得试样中铜的浓度, μg/ml; V—样品溶液中的体积,ml;W—风干样品质量×(1-γ%),g。锰、锌的计算结果同铜。 3.草—畜系统矿物元素(K、Na、Mn、Zn、Cu)流的计算 以钾为例:

1)食入牧草总钾量总钾量

K草 = D’草×K草%

K草 —食入牧草总钾量,g;D’草—牧草干物质重量,g;K草%—牧草的含钾百分率(以烘干重为基础)。 2)家畜粪便中排出钾的总量

K粪 = D’粪×K粪%

K粪—家畜粪便中排出钾的总量,g;D’粪—家畜排出粪便的总重量,g;(烘干重) K粪%—家畜排出粪便的含钾百分率。 3)家畜尿液中排出钾的总量

K尿= D’尿×K’尿

K尿—家畜尿液中排出钾的总量,g;V’尿—家畜排出尿液的总体积,ml; K’尿—家畜排出尿液的含钾率,g/ml。

教材:草原生态化学实验指导书

全国高等农业院校试用教材《草原生态化学》任继周主编,高等教育出版社。全国高等农业院校试用教材《草原生态化学》甘肃农业大学主编,农业出版社。

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