惠南中学新人教版生物教材基础实验汇总

实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞（必修一P7）

一．实验目的：

1）使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点 2）运用制作临时装片的方法

二．实验原理：利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构，例如：可以看到叶绿体、线粒体等细胞器，从而能够区别不同的细胞。

三．显微镜的使用：置镜（装镜头）→对光→置片→调焦→观察

1．安放。显微镜放置在桌前略偏左，距桌缘8—10cm处，装好物镜和目镜（目镜5× 物镜10×）

2．对光。转动转换器，使低倍镜对准通光孔，选取较大光圈对准通光孔。左眼注视目镜，同时把反光镜转向光源，直至视野光亮均匀适度。调节视野亮度只可用遮光器和反光镜，光线过强，改用较小光圈或用平面反光镜；光线过弱，改用较大光圈或用凹面反光镜。选低倍镜→选较大的光圈→选反光镜（左眼观察）

3．观察。将切片或装片放在载物台上，标本正对通光孔中心。转动粗准焦螺旋（顺时针），俯首侧视镜筒慢慢下降，直到物镜接近切片（约0.5cm），左眼观察目镜，（反时针）旋转粗准焦螺旋，使镜筒慢慢上升，看到物像时轻微来回旋转细准焦，直到物像清晰。（找不到物像时，可重复一次或移动装片使标本移至通光孔中心）。．观察时两眼都要睁开，便于左眼观察，右眼看着画图。侧面观察降镜筒→左眼观察找物像→细准焦螺旋调清晰

4．高倍镜的转换。找到物像后，把要观察的物像移到视野中央，把低倍镜移走，换上高倍镜，只准用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，直到物像

顺序：物像移到视野的中央→转动转换器换高倍镜观察→调反光镜或光圈→调细准焦螺旋 四、要点提示

1．是低倍镜还是高倍镜的视野大，视野明亮？为什么？

提示：低倍镜的视野大，通过的光多，放大的倍数小；高倍镜视野小，通过的光少，但放大的倍数高。

2．为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察？ 提示：如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。 3．用转换器转过高倍镜后，转动粗准焦螺旋行不行？

提示：不行。用高倍镜观察，只需微调即可。转动粗准焦螺旋，容易压坏玻片。 第四步：观察并用细胞准焦螺旋调焦。

4．装片的制作和移动：制作：滴清水→放材料→盖片

移动：物像在何方，就将载玻片向何处移。（原因：物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反）

5．污点判断：

（1）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上；

（2）污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜； （3）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。

实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一P18）

一．实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质

二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 1．可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu 2O沉淀。如：

加热

葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓（砖红色）+ H 2O， 即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

2．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。

3．蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu作用，产生紫色反应。） 4．淀粉遇碘变蓝色。 三．实验材料

1．做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。）

2．做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。

3．做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 四、实验试剂

斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。 五、方法步骤：

（一）可溶性糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 1. 制备组织样液。 苹果或梨组织液必须临时制（去皮、切块、研磨、过滤） 备。 2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂； 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。 最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。 也可用酒精灯对试管直接加热。 解 释 因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。 斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的 Cu ( OH ) 2在70~900C下分解成黑色CuO和水； 甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无 Cu ( OH ) 2生成。 防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； 缩短实验时间。 2+

4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → 砖红色（沉淀） （二）脂肪的鉴定 操 作 方 法 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。 在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 注 意 问 题 干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间可缩短。 染色时间不宜过长。 解 释 因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 用吸水纸吸去薄片周围酒精， 滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。 低倍镜下找到花生子叶薄片装片不宜久放。 的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。 （三）、蛋白质的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 制备组织样液。 （浸泡、去皮研磨、过滤。） 鉴定。加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A，摇匀；再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀，溶液变紫色。 A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加A液后加B液。 CuSO4溶液不能多加。 酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 时间一长，油滴会溶解在乙醇中。 可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。 解 释 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 2+先加NaOH溶液，为Cu与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导2+致Cu变成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。 否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。 如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。 以免影响颜色观察 附：淀粉的检测和观察 用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。 六、要点提示

碘液不要滴太多 1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 答：葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。

2、还原性糖植物组织取材条件？ 答：含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。

3、研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 答：加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。

4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 答：混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。

5、还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为？ 答：浅蓝色 棕色 砖红色。 6、花生种子切片为何要薄？ 答：只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。 7、转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？ 答：切片的厚薄不均匀。

8、脂肪鉴定中乙醇作用？ 答：洗去浮色。

9、双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？先加A液的目的怎样通过对比看颜色变化？ 答：不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比

实验三：观察DNA、RNA在细胞中的分布（必修一P26）

一．实验目的：初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法 二．实验原理：

1．甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。

2．盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。

三．方法步骤： 操作步骤 注意问题 取口腔上载玻片要洁净，滴一滴质量分数皮细胞制为0.9%的NaCl溶液 片 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞 将载玻片在酒精灯下烘干 水解 将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中，用300C水浴保温5min 冲冼涂片 用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S 染色 滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min 观察 先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察 解释 防止污迹干扰观察效果 保持细胞原有形态 消毒为防止感染，漱口避免取材失败 固定装片 改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色 洗去残留在外的盐酸 使观察效果最佳 四、要点提示： 1、取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质； 2、取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞； 3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗； 4、用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻

片均匀受热，以免破裂；

5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟。

实验四：体验制备细胞膜的方法

一、实验原理：细胞膜的流动性和半透性

二、实验材料：猪（或牛、羊、人）的新鲜的红细胞稀释液（血液加适量的生理盐水） 三、实验用具：蒸馏水、试管、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜 四、方法步骤：

1、用试管吸取少量红细胞稀释液，滴一小滴在载玻片上，盖上盖玻片，制成临时装片 2、在高倍镜下观察，待观察清晰时，在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水，同时在另一侧用吸水纸小心吸引，注意不要把细胞吸跑。上述操作均在载物台上进行，并持续观察细胞的变化。可以看到近水的部分红细胞发生变化；凹陷消失，细胞体积增大，很快细胞破裂，内容物流出。

五、要点提示：

1、选择动物细胞进行实验的原因：动物细胞无细胞壁。

2、选择哺乳动物成熟红细胞进行实验的原因：人和其他哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多的细胞器（膜），可以得到较纯净的细胞膜。

3、细胞破裂后，用什么方法获得较纯的细胞膜：将涨破的细胞溶液，经过离心分离得到细胞膜。

4、如何获得植物细胞膜：先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁水解得到原生质体；再将原生质体放入清水中，水自由扩散进入，原生质体涨破；最后经过离心分离得到植物细胞膜。 5、稀释及稀释的时候用生理盐水的原因：稀释后，可以减少血液中的血浆蛋白等杂物。用生理盐水是为了保持渗透压，防止在稀释的时候就发生细胞破裂。

实验五 用高倍镜观察线粒体和叶绿体（必修一P47）

一．实验目的：

使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。 二．实验原理：

叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。

线粒体辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。 健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。 三．实验材料：

观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。

若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。 四．方法步骤：

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