2019届《金版教程》高考一轮生物复习考点突破35a(2)

分瓶后的培养称为传代培养；当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即会发生接触抑制现象，用胰蛋白酶可使组织细胞分散开来。

(2)为制备单克隆抗体，需将特定抗原注射到小鼠体内，以此获取分泌特定抗体的B淋巴细胞，同时可选取图中D点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞，因为该点部分细胞已癌变，形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，其细胞膜上的糖蛋白比正常细胞显著减少。

(3)为筛选出能够产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，可用选择培养基达到目的。杂交瘤细胞具有既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的特点。

5．(2018·江西赣州崇义中学月考)早早孕试纸是人们设计出来的一种方便女性检测自己是否怀孕的产品。人绒毛膜促性腺激素(HCG)是由受孕妇女体内胎盘产生的一种糖蛋白类激素，在孕妇的尿液中大量存在，而非妊娠孕妇尿液中几乎不含有该激素。胶体金法早早孕检测试纸采用双抗体夹心法原理，以胶体金为指示标记制作而成。其测定和判断方法如图：

注：MAX线处含有鼠源性HCG单抗和胶体金，T线处含羊抗HCG的抗体，C线处含有羊抗鼠多克隆抗体。

(1)HCG在胎盘细胞的________合成，然后在________上进一步

合成加工，最后经________进一步的修饰加工然后分泌到细胞外。

(2)MAX线处包埋的鼠源性HCG单克隆抗体是由________细胞产生的，由于单克隆抗体具有________、________的特点，所以能准确地识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合。

(3)制备鼠源性HCG单克隆抗体的过程中，可能运用到了________和动物细胞培养等技术，其中后者需要置于95%空气加5%的CO2的混合气体的培养箱中进行培养，CO2的作用是________。

答案 (1)核糖体 内质网 高尔基体 (2)杂交瘤 纯度高 特异性强(灵敏度高) (3)动物细胞融合技术 维持培养液的pH值

解析 (1)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是由受孕妇女体内胎盘产生的一种糖蛋白类激素，是在胎盘细胞的核糖体合成，然后在内质网上进一步合成加工，最后经高尔基体进一步的修饰加工然后分泌到细胞外。

(2)MAX线处包埋的鼠源性HCG单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的，由于单克隆抗体具有纯度高、特异性强(灵敏度高)的特点，所以能准确地识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合。

(3)制备鼠源性HCG单克隆抗体的过程中，可能运用到了动物细胞融合技术和动物细胞培养等技术，其中后者需要置于95%空气加5%的CO2的混合气体的培养箱中进行培养，CO2的作用是维持培养液的pH值。

6．(2017·山东泰安一模)克隆良种猪成功率较低，该现象与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可检测出该基因的转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细

胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图，图中a、b、c、d分别代表流程中某过程，请回答：

(1)图中重组细胞的细胞核来自________细胞。a过程采用的技术手段称做________技术。

(2)b过程所用的培养液与植物组织的培养基从成分上主要区别是前者必须含有________；c过程表示________。

(3)d过程需要________酶的催化，从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成2种________用于PCR扩增，除此以外在PCR反应体系中还应包含的主要成分有扩增缓冲液、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA以及__________________，PCR扩增过程第一轮循环的模板是________________。

(4)若cDNA经PCR技术n次扩增后检测出其中Bcl-2 cDNA的分子数为m，则总mRNA中的Bcl-2 mRNA的分子数比例为________，从而说明不同胚胎时期Bcl-2基因的转录水平及其与细胞凋亡的关系。

答案 (1)良种猪的体 体细胞核移植 (2)动物(猪)血清 胚胎移植

(3)逆转录 引物 Taq酶(热稳定DNA聚合酶) Bcl-2 cDNA m(4)n 2

解析 (1)图中a过程采用的技术手段是体细胞核移植技术，即把良种猪的体细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，构建一个新的重组细胞。

(2)动物细胞培养的培养液不同于植物组织培养的培养基，主要区别是动物细胞培养液中需要加入动物血清等天然成分，c表示胚胎移植过程。

(3)由以上分析可知d表示逆转录过程。PCR技术需要2种引物，此时PCR扩增技术是在高温条件下进行的，还需要热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。扩增第一轮循环的模板是Bcl-2 cDNA。

(4)cDNA是由mRNA逆转录形成的，1个cDNA经PCR技术n次扩增后可形成2n个子代DNA分子，转录是以DNA分子的一条链为模板合成RNA的过程，因此总的mRNA的数目也为2n，若检测出其中Bcl-2 cDNA的分子数为m，则Bcl-2 mRNA的分子数也为m，总

mmRNA中的Bcl-2 mRNA的分子数比例为n，从而说明不同胚胎时期

2Bcl-2基因的转录水平及其与细胞凋亡的关系。

7．(2017·山东德州二模)已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图。

请回答：

(1)①代表的是________过程。为获得A基因表达载体，需用________酶对A基因和载体进行切割。将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是________。

(2)利用PCR技术扩增A基因时，设计引物序列的主要依据是__________________________，加入引物的作用是______________________________________________。

(3)与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制________等条件。

(4)过程③采用的技术是________，获得的X叫______细胞。 答案 (1)逆转录 限制 显微注射法

(2)A基因两端的部分核苷酸序列 与A基因单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸

(3)温度 (4)动物细胞融合 杂交瘤

解析 (1)由以上分析可知①是逆转录过程。构建基因表达载体时，首先需要用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体，其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA。将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。

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