糖化酶的固定化及其在葡萄糖 生产中的应用工艺(2)

图1 葡萄糖标准曲线 0.7 0.6 0.5 A540nm y = 0.3387x - 0.0197 R2 = 0.998 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 0.5 1 1.5 2 葡萄糖含量/mg

表4 原酶吸光值

原酶 A540 A540平均值 酶活力单位 总活力单位

表5 固定化酶与残留酶吸光值

固定化时间（min） A540 残留酶 平均值 固定化酶 平均值 0.1455 0.251 0.233 0.253 0.267 0.289 残留液体积（mL） 45 47 46 48 43 48 含量 固定化酶含量（g） 17.1 15.6 16.1 14 14 16.9 1 0.244 0.258 0.8199 819.9 2 0.272 10 20 30 40 50 60 0.289 0.298 0.269 0.239 0.237 0.183 0.297 0.342 0.253 0.271 0.219 0.189 0.293 0.32 0.261 0.255 0.228 0.186 0.151 0.243 0.239 0.248 0.286 0.292 0.140 0.259 0.227 0.258 0.248 0.286

表6实验结果计算

固定化残留酶时间葡萄糖（min） 含量（g） 固定化酶葡萄糖含量（g） 0.1mL残留酶活力单位 0.2g固定化酶活力单位 残留酶总活力单位 固定化活力回酶总活收 力单位 相对活力 偶联率 10 20 30 40 50 60 44.32 43.13 39.78 37.31 34.37 27.33 8.34 12.47 12.01 11.27 11.85 15.40 8.864 8.626 7.956 7.462 6.874 5.466 1.668 2.494 2.402 2.254 2.37 3.08

425.472 370.918 381.888 343.252 323.078 28.5228 38.9064 38.6722 3.47％ 4.74％ 4.71％ 31.556 3.84％ 33.18 4.04％ 245.97 52.052 6.34％ 7.23％ 8.66％ 8.82％ 6.62％ 6.67％ 9.06％ 48.10％ 54.76％ 53.42％ 58.13％ 60.59％ 70.00％ 表7 固定化10min第一次生产A540 试管号 1 2 3 4 5 6 7 8 A540 0.139 0.137 0.133 0.129 0.124 0.121 0.117 0.116 淀粉溶液生产时间体积（mL） （min） 30 5 10 15 20 25 30 35 40

表8固定化10min第二次生产A540 试管号 A540 淀粉溶液生产时间样品葡萄总葡萄糖葡萄糖生样品葡萄糖含量 0.469 总葡萄糖含量 14.057 葡萄糖生产效率 2.811 0.463 0.451 0.439 0.424 0.415 0.404 0.401 13.880 13.525 13.171 12.728 12.462 12.108 12.019 2.776 2.705 2.634 2.546 2.492 2.422 2.404 体积（mL） （min） 1 2 3 4 5 6 7 8 0.113 0.102 0.089 0.077 0.059 0.036 0.022 0.018 30 5 10 15 20 25 30 35 40

糖含量 含量 产效率 0.391 0.359 0.320 0.285 0.232 0.164 0.123 0.111 11.73 10.77 9.6 8.55 6.96 4.92 3.69 3.33 2.346 2.154 1.92 1.71 1.392 0.984 0.738 0.666 图2 两次生产的A540 0.16 0.14 0.12 0.1 A540 0.08 0.06 0.04 0.02 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 试管号

4．结论

由表5、表6可知，固定化酶的活力回收、相对活力、 偶联率均随着固定化的时间的增加而增加，因此固定化酶效果最好的是60min。

我们小组做的固定化10min，所以以下分析根据固定化10min的结果进行分析！ 固定化酶总活力单位加残留酶总活力单位仅为453.9948，而原酶总活力单位有819.9，占比为55%，可能原因有：在固定化过程中，损耗的固定化酶的质量太多；残留液测量不准确；有可能在测量酶活的时候先加入 3,5-二硝基水杨酸后加入酶液，导致计算过程中有大误差。

在两次生产过程中，葡萄糖生产效率随着时间的减小而减小，符合生产规律。葡萄糖

生产效率最高的时间点为前5min。

5.实验心得

在本次实验过程中，我们学习到了如何正确的固定化酶，虽然固定化酶的相对活力很低，但是在这过程中，我们学会了很多新知识，我们可以自己实操地生产出固定化酶，可以简单地使用固定化酶生产葡萄糖，这对于我们的相关知识得到了巩固！感谢王老师以及柯老师的悉心教导，也谢谢组员们的相互配合！

6.参考文献

[1] 柯德森.生物工程下游技术实验手册.北京:科学出版社.2010. [2] 陈雄. 固定化糖化酶的研究[J]. 中国酿造. 2001(02)

[3] 孙俊良,赵瑞香,李国龙,汪金萍. 糖化酶固定化技术在糯米酒生产中的应用 [J]. 食品与发酵工业. 2004(04)

[4] 周剑平,魏甲乾,龚伟中,王治业,杨晖. 固定化糖化酶性质及其应用的研究 [J]. 甘肃工业大学学报. 2003(04)

[5] 王家东,姜子明,曹彬,毕韬韬,侯红萍. 固定化糖化酶的研究[J]. 中国调味品. 2006(03)

百度搜索“77cn”或“免费范文网”即可找到本站免费阅读全部范文。收藏本站方便下次阅读，免费范文网，提供经典小说综合文库糖化酶的固定化及其在葡萄糖 生产中的应用工艺(2)在线全文阅读。