点击化学研究进展及其在药学领域的应用(2)

于类似血凝素蛋白质的识别。其中，叠氮基团修饰的半乳糖在室温下通过CuI／DIPEA催化与疏水的丙烯酰胺发生环加成反应，然后丙烯酰胺再以非共价键的方式附于聚苯乙烯载体上。实验表明绑定了D-半乳糖苷的蓖麻蛋白B血凝素蛋白能成功地被糖阵列筛选。Wong课题组[29]还报道了一种使用点击化学作为主要固定途径的非共价键糖阵列，它可以用于Fuc-T抑制剂的高效能筛选。为开发更稳定的高效能筛选方案。 6.免疫荧光检测

孙丹等[30]报道了一种新型免疫荧光标记方法及其在细胞荧光检测中的用。首先，合成了2个关键的化合物6-叠氮-己酸琥珀酰亚胺活性酯和4-乙炔基一Ⅳ-乙基-1，8-萘酰亚胺，并将合成的6-叠氮-己酸琥珀酰亚胺活性酯与抗her2抗体Anti—HPl5的游离氨基偶联获得叠氮化IgG；随后通过铜离子化4-乙炔基-N-乙基-1，8-萘酰亚胺中的炔基与标记抗体的叠氮基团进行点击化学反应，同时以NHS-FITC和NHS-Rhodamine标记的抗体为阳性对照，测定了该标记方法的灵敏度，其检出限可达0.1μg，EC50结果与阳性对照相当。然后，在细胞水平上进行染色分析。结果表明，叠氮标记抗体可有效应用于免疫荧光染色分析。最后，采用激光共聚焦三通道复合荧光分析法对不同标记方法及其对应的免疫荧光显色方法进行了研究，确认采用本文方法标记的抗体可与其它免疫荧光技术同时使用，且结果互不干扰。本研究通过开发一种新型的抗体标记技术，建立了一种新的免疫荧光抗体分析方法，并在细胞水平上进行了应用验证，丰富了免疫荧光抗体检测手段。该方法在未来的免疫研究中具备发展潜力和广泛的应用前景。

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