蔬菜中维生素c的测定(2)

? 0.001mol/L KIO3标准溶液。 ? 2，6-二氯酚靛酚溶液。 ? 1mg/ml抗坏血酸标准溶液。

六、实验步骤

? 2，6-二氯酚靛酚标准液的标定

? 吸取1mg/ml抗坏血酸溶液1ml置于锥形瓶中，加10ml 20g/L草酸，摇匀，用2，6-二氯酚靛酚滴定至溶液呈淡红色。在15s不消失为终点。计算出1ml染料相当于多少毫克抗坏血酸（取10ml 20g/L草酸作空白对照）计算滴定度T：

维生素C的提取和测定

? 1、称取10 g新鲜生菜样品，置研钵中，分次加20ml 20g/L草酸，研成匀浆，用的20g/L草酸定容100ml。通过纱布过滤后取10ml放于离心机中3000r/min离心10min,吸取上清使用。

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2、吸取滤液10 ml，放入50 ml三角瓶中，立即用已标定的2，

6-二氯酚靛酚溶液滴定至出现明显的粉红色在15 s内不消失为止。记录所用滴定液体积。另取10ml 20g/L草酸作空白对照实验。

七、结果计算

? V1---滴定空白所用染料溶液的体积，ml ? V2---滴定样品所用染料溶液的体积，ml ? T---2，6-二氯酚靛染料溶液的滴定度,mg/ml ? M---样品的质量，g

2,6—二氯靛酚溶液的标定

样品中维生素C含量的测定

? V1---滴定空白所用染料溶液的体积，ml ? V2---滴定样品所用染料溶液的体积，ml ? V----吸取维生素C标准溶液的体积，ml

八、注意事项

? 1、本法测定的结果为食品中的还原型抗坏血酸含量，而非维生素C总量。此法是测定还原型抗坏血酸最简便的方法，适合于大批果蔬，但对红色果蔬不太适宜。

? 2、维生素C在酸性条件下较稳定，故样品处理或浸提都应在弱酸性环境中进行。浸提剂以偏磷酸 (HPO3) 稳定维生素C效果最好，但价格较贵。一般可采用草酸 (20g/L)代替偏磷酸，价廉且效果也较好。

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3、Vc不稳定，在空气中易被氧化，研磨时，尽可能要快，以减少Vc的氧化。

? 4、样品处理过程中加入等量的2%草酸，目的是抑制抗坏血酸氧化酶，避免维生素C氧化损失，也可用2%偏磷酸代替。 ? 5、某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆状物在100 mL容量瓶中泡沫太多，可加入戊醇2~3滴消除之。 ? 6、同法作空白实验，消除系统误差。

? 7.操作要迅速，防止还原型维生素C被空气中的氧化。滴定过程一般不超过2min。滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL，如果样品含维生素C太高或太低时，可酌情增减样液用量或改变提

取液稀释度。 干扰滴定因素有：

? 1、色素 若提取液中色素很多时，滴定不易看出颜色变化，可用白陶土脱色，或加1mL氯仿，到达终点时，氯仿层呈现淡红色。 ? 2、 Fe2+可还原二氯酚靛酚。对含有大量Fe2+的样品可用8%乙酸溶液代替草酸溶液提取，此时Fe2+不会很快与染料起作用。 ? 3、维生素C提取时要避光、避免与铜铁接触，以免Vc氧化。

九、实验结果与讨论

? 1、为什么在测定维生素C的同时要进行2,6-D溶液的标定？ ? 2、为了保证抗坏血酸含量测定准确， 应注意些什么？ ? 3、为了测得准确的维生素C含量，实验过程中都应注意哪些操作步骤？为什么？

? 4、食品中维生素C测定的方法有哪些，各自的原理和适用范围是什么？

? 5、测定脂溶性维生素时样品需如何处理？

? 6、测定水溶性维生素时、从样品中提取浓缩可采用那些方法？ ? 7、加入20g/L草酸溶液的目的是什么？

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